1、成纖維細胞生長因子(fibroblast growth factor,FGF)在人體內分布廣泛,主要包括堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和酸性成纖維細胞生長因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)兩大類。堿性成纖維細胞生長因子已應用于臨床,促進組織損傷及傷口修復。而酸性成纖維細胞生長因子也能誘導傷口附近的組織細胞如血管平滑肌細胞、成纖

2、維細胞、肌纖維母細胞的分裂、增殖,加速膠原纖維的合成,促進皮膚和黏膜創(chuàng)面的愈合。正常情況下,人酸性成纖維細胞生長因子(haFGF)含量很低,有學者利用基因工程技術,將haFGF基因重組進大腸埃希菌質粒中,獲得了高效表達生物活性產物的工程菌株,其化學結構、理化性質和生物活性與人體內haFGF完全一致。在本實驗中應用現有重組haFGF(rhaFGF)產品進行有關動物創(chuàng)傷愈合的藥理學實驗,以期為該藥的進一步研究提供理論依據。
　　本文主

3、要從以下三個部分展開論述：
　　第一部分：rhaFGF對糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面的影響
　　目的：觀察rhaFGF.對糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面的影響。
　　方法：建立糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面模型,分4組進行實驗觀察:其中2組分別按90,60AU/cm2的劑量給予rhaFGF,陽性對照組按60AU/cm2的劑量給予rb-bFGF,陰性對照組給予等量基質,采用創(chuàng)面照相和透明膜描記法記錄傷后第4,8,14天創(chuàng)面面積;對創(chuàng)面面

4、積的組間差異進行統(tǒng)計學分析。在傷后第8天和第14天,取創(chuàng)面組織,經10％甲醛溶液固定后制片,常規(guī)HE染色,觀察創(chuàng)面肉芽組織生長與再上皮化變化,評價修復效果。
　　結果：各組大鼠創(chuàng)面面積隨傷后時間的延長逐漸縮小,其中rhaFGF高劑量組(90AU/cm2)和rb-bFGF治療組(60AU/cm2)大鼠的療效更顯著。組織學檢查,可見經 rhaFGF高劑量組(90AU/cm2)和 rb-bFGF治療組(60AU/cm2)治療8天后大鼠的

5、創(chuàng)面成纖維細胞生長活躍,數量多,毛細血管胚芽與成纖維細胞數量顯著多于陰性對照組和 rhaFGF治療量組(60AU/cm2)。傷后第14天,rhaFGF高劑量組(90AU/cm2)和rb-bFGF治療組(60AU/cm2)的大鼠創(chuàng)面病理切片顯示再上皮化明顯,治療效果明顯優(yōu)于陰性對照組和 rhaFGF治療量組(60AU/cm2)。
　　結論：rhaFGF.對糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面有促修復作用,可促進創(chuàng)面肉芽組織生長、毛細血管胚芽形成

6、與再上皮化。
　　第二部分：rhaFGF對糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面的轉化生長因子-β1(TGF-β1)和血管內皮生長因子(VEGF)表達的影響.
　　目的：觀察rhaFGF對糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面的TGF-β1和VEGF表達的影響,深入探討rhaFGF在組織修復中的作用機制。
　　方法：首先建立糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面模型,分四組進行觀察,其中2組分別按90,60AU/cm2的劑量給予rhaFGF,陽性對照組按60A

7、U/cm2的劑量給予rb-bFGF,陰性對照組給予等量基質。在傷后第8天和第14天,取創(chuàng)面組織,經10%甲醛溶液固定后制片,采用免疫組化方法檢測各組傷后不同時間點創(chuàng)面愈合組織中TGF-β1與VEGF的表達情況。
　　結果：創(chuàng)面組織中TGF-β1的表達量逐漸增加,其中以rhaFGF高劑量組(90AU/cm2)和rb-bFGF治療組(60AU/cm2)更為明顯。創(chuàng)面組織中VEGF的表達量逐漸減少,但是rhaFGF高劑量組(90AU/c

8、m2)和rb-bFGF治療組(60AU/cm2)陽性細胞的表達個數仍然顯著多于陰性對照組和rhaFGF治療量組(60AU/cm2)。
　　結論：rhaFGF可能通過上調糖尿病大鼠創(chuàng)面中TGF-β1和VEGF的表達,從而促進肉芽組織生長和毛細血管胚芽形成使得愈合周期顯著縮短。
　　第三部分：rhaFGF對創(chuàng)面愈合后期的影響
　　目的：觀察rhaFGF對創(chuàng)面愈合后期的影響,深入探討rhaFGF在組織修復后期中的作用機制。<

9、br>　　方法：利用大鼠創(chuàng)面模型,采用免疫組化方法檢測傷后不同時間點創(chuàng)面愈合組織中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表達情況;采用羥脯氨酸測試法檢測傷口中膠原纖維的含量,并對照觀察創(chuàng)面應用rhaFGF后以上各項指標的變化。
　　結果：創(chuàng)面組織中caspase-3的表達量逐漸增加,外用rhaFGF后第14天和21天的caspase-3表達量顯著高于單純創(chuàng)傷組。傷口中羥脯氨酸的含量逐漸增加,外用rhaFGF后第8天和1