1、蛋白質(zhì)作為生命物質(zhì)基礎(chǔ)，與各種形式的生命活動(dòng)緊密聯(lián)系在一起，它參與生命體的每一步反應(yīng)和活動(dòng)，與營(yíng)養(yǎng)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、酶、激素、病毒、免疫、物質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)、遺傳、乃至生命的起源和進(jìn)化都有密切關(guān)系。蛋白質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)含量最高的組分，酶、抗體、多肽激素、以及細(xì)胞的自身骨架都是由它所構(gòu)成的。它占許多生物體干重的45％～50％以上，承載著生物體完成各種生物功能的任務(wù)。所以蛋白質(zhì)的分析一直是生命科學(xué)中的重要課題。蛋白質(zhì)的定量測(cè)定是研究蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)，對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功

2、能研究，人體營(yíng)養(yǎng)健康研究，疾病診斷以及藥物、食品及臨床分析中有重要意義。生命科學(xué)的飛速發(fā)展對(duì)蛋白質(zhì)的檢測(cè)提出越來(lái)越高的要求，而現(xiàn)存的蛋白質(zhì)傳感器技術(shù)還在起步階段。開(kāi)發(fā)出更靈敏，穩(wěn)定和簡(jiǎn)便的蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)是目前生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)所在。 核酸適體是一種能夠以高親和力特異性結(jié)合蛋白質(zhì)的寡核苷酸。相較普通的蛋白檢測(cè)技術(shù)，核酸適體有著無(wú)可比擬的優(yōu)越性。與分子信標(biāo)技術(shù)聯(lián)用后所得的適體信標(biāo)更是一種高選擇性，高靈敏度檢測(cè)蛋白的工具。本論文首次構(gòu)

3、建了一種新型電化學(xué)適體信標(biāo)。這種適體信標(biāo)可通過(guò)其信號(hào)分子——一種電化學(xué)活性一非活性分子對(duì)在溶液中直接進(jìn)行生物分子識(shí)別。本文又結(jié)合適體信標(biāo)技術(shù)和磁性納米技術(shù)，設(shè)計(jì)了一種新型蛋白質(zhì)傳感器，并將其應(yīng)用到對(duì)蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)中。此蛋白傳感器既有高選擇性，高靈敏度和廣泛的應(yīng)用范圍，又有電化學(xué)檢測(cè)的靈敏、快速，簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，有著很高的應(yīng)用價(jià)值。 論文分為四章： 第一章緒論 介紹了蛋白質(zhì)檢測(cè)的目的與意義；對(duì)現(xiàn)代蛋白檢測(cè)的幾種方法作

4、了簡(jiǎn)單的分析與評(píng)述，著重分析了電化學(xué)分析法定量檢測(cè)蛋白的方法和進(jìn)展；介紹了核酸適體技術(shù)及其檢測(cè)蛋白的優(yōu)越性：介紹了分子信標(biāo)技術(shù)，對(duì)其檢測(cè)目標(biāo)的不同方法分別做了評(píng)述；介紹了磁性納米顆粒技術(shù)在生物分析中的應(yīng)用和優(yōu)勢(shì)。最后提出本論文的目的意義及創(chuàng)新之處。第二章胭脂紅酸的機(jī)理探討本章采用電化學(xué)以及紫外光譜法對(duì)一種羥基葸醌類化合物——胭脂紅酸(carrainic acid，CA)進(jìn)行了研究。通過(guò)對(duì)其紫外光譜的研究，對(duì)其各級(jí)質(zhì)子離解常數(shù)進(jìn)行了計(jì)算。

5、并發(fā)現(xiàn)其在中性條件下主要以H<,3.CA<'2->/H<,2>CA<'3->形式存在，此時(shí)兩個(gè)胭脂紅酸分子之間有形成氫鍵并締合的可能。電化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)胭脂紅酸有著靈敏的電化學(xué)響應(yīng)。其在負(fù)電位下會(huì)發(fā)生脫糖反應(yīng)，脫糖反應(yīng)后胭脂紅酸發(fā)生雙分子締合并失去電化學(xué)活性。最后根據(jù)對(duì)胭脂紅配合常數(shù)的計(jì)算，推測(cè)胭脂紅酸的締合常數(shù)應(yīng)小于344。 第三章基于電化學(xué)活性．非活性分子對(duì)適體信標(biāo)的新型蛋白質(zhì)生物傳感器測(cè)定凝血酶的研究本章將胭脂紅酸作為電化學(xué)適

6、體信標(biāo)的信號(hào)分子，通過(guò)信標(biāo)構(gòu)型的改變使其表現(xiàn)出可在電化學(xué)活性．非活性間切換的性質(zhì)。并且將這種電化學(xué)適體信標(biāo)與磁性納米顆粒的磁性分離富集技術(shù)相結(jié)合，設(shè)計(jì)了一種新型的電化學(xué)蛋白質(zhì)生物傳感器，用于凝血酶的檢測(cè)。在檢測(cè)過(guò)程中采用特制的電解池進(jìn)行磁性富集，通過(guò)對(duì)磁性固相載體的富集使檢測(cè)靈敏度大大提高。這種新型的電化學(xué)生物傳感器對(duì)凝血酶的響應(yīng)線性范圍為7.76×10<'-12> mol/L～1.176×10<'-10> mol/L，相關(guān)系數(shù)為0.9

7、986，檢出限為1.29×10<'-12> mol/L。并且由于利用了磁性納米顆粒的分離技術(shù)，此蛋白質(zhì)傳感器再生方便。研究結(jié)果表明，此新型蛋白質(zhì)生物傳感器制作簡(jiǎn)單，并可實(shí)現(xiàn)靈敏，高效，方便的檢測(cè)。在生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域有一定的應(yīng)用價(jià)值。 第四章新型蛋白質(zhì)生物傳感器與凝血酶結(jié)合的熱力學(xué)研究核酸適體與其目標(biāo)物有著很高的親和力，對(duì)適體與蛋白的相互作用研究并探討其作用機(jī)理，有利于為適體的設(shè)計(jì)，篩選，以及作用條件的選擇提供理論依據(jù)。本文利用基于