1、研究目的： 研究CD28超家族共刺激分子、CD4+調(diào)節(jié)性T細胞在再生障礙性貧血(AA)發(fā)病中的可能機制。 方法： 1．以15例IDA為對照組，用流式細胞術(shù)檢測23例發(fā)病期和1O例恢復(fù)期AA患者骨髓CD4+T淋巴細胞表面CD28超家族共刺激分子表達情況，骨髓CD4+T淋巴細胞胞漿內(nèi)細胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-p1、IL一10及CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞數(shù)量變化； 2．分析AA患者骨髓CD4+T

2、淋巴細胞表達的共刺激分子與CD4+CD25+、CD4+IFN-γ+、CD4+IL-4+、CD4+TGF-β1+、CD4+IL-1O+細胞及ANC的相關(guān)性。 結(jié)果： 1．AA發(fā)病期，骨髓CD4+T淋巴細胞膜表面CD28表達較IDA對照組明顯增加(P=0.028<0.05)；AA恢復(fù)期，CD28分子表達較發(fā)病期(P=0．000<0．01)及IDA對照組(P=0．048<0.05)顯著降低。三組患者ICOS表達水平相比較，均無

3、顯著性差異(P>0．05)。 2．AA發(fā)病期，骨髓CD4+T淋巴細胞膜表面CTLA-4表達較IDA對照組明顯下降(P=0.004<0.01)；PD-1表達與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.171>0．05)。AA恢復(fù)期，兩者表達水平均較發(fā)病組明顯升高(PCTLA-4=0．001<0．01，PPD-1=0.047<0．05)，與對照組無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 3．AA發(fā)病期，患者骨髓CD4+T淋巴細胞中CD28+/C

4、TLA-4+、CD28+／pD-1+比值較IDA對照組顯著升高(PCD28+／CTLA-4+=0.048<0．05,PCD28+／PD-1+=0.040<0．05)。AA恢復(fù)期，CD28+／CTLA-4+及CD28+／pD一1+比值明顯低于發(fā)病組(PCD28+／CTLA-4+=D．042<0.05，PCD28+／PD-1+=0.003<0．01)，而與對照組比較，差異無顯著性(P>0.05)。 4．發(fā)病期，AA患者骨髓中CD4+

5、CD25+T淋巴細胞數(shù)與對照組比較，差異無顯著性（P=0．093>0。05)；AA恢復(fù)期，CD4+CD25+T淋巴細胞數(shù)與發(fā)病組比較，p=0．857>0．05；與IDA對照組相比，恢復(fù)期患者CD4+CD25+T細胞數(shù)顯著增加(P=D．040<0.05)。 5．發(fā)病期，AA患者CD4+T淋巴細胞中IFN-7及IL-4水平與IDA對照組比較，僅IFN-γ明顯增加，差異有顯著性(P=0．000<0.01)，IFN-γ+/IL-4+比值

6、較對照組明顯增加(P=0．000<0.01)；至恢復(fù)期，AA患者IFN-γ(P=0．021<0.05)及IFN-γ+/IL-4+比值(P=0．015<0．05)較發(fā)病期明顯下降，已基本與對照組的水平相當(P>0.05)，IL-4水平與AA發(fā)病期及IDA對照組均無顯著差異(P>0．05)。發(fā)病期，AA患者CD4+T淋巴細胞中TGF-p1及IL．10水平與對照組比較，均無明顯變化(P>D．05)，IFN-γ+／TGF-βI+及IFN-γ+/

7、IL-lO+細胞較對照組明顯增加(PIFN-γ+／TGF-βI+=0.004<0.01，PIFN-γ+／IL-10+=0.017<0.05]；恢復(fù)期，AA患者TGF-pl、IL．1O水平及IFN-γ+/TGF-pr、IFNγ+/IL-10+比值與發(fā)病組和IDA對照組均無顯著差異(P>0.05)。 6．CD28+/CTLA-4+與IFN-γ+IL-4+比值成正相關(guān)關(guān)系(r=0.548,P=0．034<0.05)；ICOS及PD-1

8、表達與CD4+CD25+T淋巴細胞數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.593,P=0．000<0.01;r=0．495,p=0．003<0．01)。ANC與CD44-CD28+T細胞數(shù)呈負相關(guān)(r=-0．484，p=0．008<0.01)，與CD4+CTLA-44-T細胞數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.663,p=0．000<0.01)。 結(jié)論： 1．AA患者骨髓CD41淋巴細胞表面正性調(diào)控共刺激分子CD28增加，負性調(diào)控分子CTLA-4減

9、少，T淋巴細胞處于“預(yù)激活"狀態(tài)，對抗原敏感性增強，更容易被異常抗原激活，可能是AA患者T淋巴細胞免疫功能亢進的原因之一。 2．AA發(fā)病期，正負性調(diào)控共刺激分子平衡失調(diào)fCD28+/CTLA-4+、CD28+/PD-1+)，致免疫平衡發(fā)生偏移，增強異常免疫應(yīng)答，可能參與AA的T淋巴細胞免疫異常。 3．AA患者CD44-T淋巴細胞分泌Thl型細胞因子IFN-7增多，Th2型細胞因子IL-4減少，IFN-γ+／IL-4+比例

10、失衡，免疫格局向nl型偏移；同時IFN-γ+／TGF-β1+及IFN-γ+／IL-10+比值增加，骨髓造血微環(huán)境中增強／抑制免疫反應(yīng)的細胞因子比例失調(diào)，可能是造成骨髓造血功能衰竭的原因之一。CD44-CD25+調(diào)節(jié)性T細胞在AA恢復(fù)期明顯增加，參與對異常自身免疫的抑制，促進AA恢復(fù)。 4．CD28+/CTLA-4+與IFN-γ+/IL-4+正相關(guān)，提示CD28超家族共刺激分子表達異常促進AA細胞免疫格局向Thl型偏移；ANC與C