1、目的：
　　 構建含早期生長反應基因-1(Egr-1)啟動子調控的人鈉碘轉運體(hNIS)基因重組質粒，并轉染至人宮頸癌Hela細胞中特異性表達。探討Egr-1啟動子調控的hNIS基因介導宮頸癌放射性核素顯像和治療的可能性。
　　 方法：
　　 1.提取FL*-hNIS/pcDNA3質粒，并以Egr-1/pMR18T為模板PCR擴增Egr-1啟動子序列，亞克隆至FL*-hNIS/pcDNA3質粒，構成重組質粒Eg

2、r-1-hNIS/pcDNA3，酶切電泳鑒定。
　　 2.將Egr-1-hNIS/pcDNA3質粒轉染至人宮頸癌Hela細胞中，G418篩選出細胞克隆，流式細胞儀篩選出hNIS表達率最高的細胞株Hela-Egr-1-hNIS。同法以FL*-hNIS/pcDNA3質粒轉染并篩選出的Hela-FL*-hNIS細胞株作為陽性對照，未轉染的Hela細胞作為陰性對照，RT-PCR鑒定hNIs基因的表達。
　　 3.碘攝取實驗、Na

3、ClO4抑制實驗及碘流出實驗評價細胞體外攝碘功能，克隆形成實驗評價碘-131對細胞的體外治療效果;Hela-Egr-1-hNIS細胞另外給予不同劑量的X線輻照后再行碘攝取實驗及碘流出實驗，評價Egr-1啟動子對hNIS蛋白功能的輻射誘導作用。
　　 4.建立Hela-FL*-hNIS細胞、Hela-Egr-1-hNIS細胞及Hela細胞荷瘤裸鼠模型。用Na125I進行體內分布，計算不同時間點移植瘤及各主要臟器組織的％ID/g和瘤

4、體/非瘤體組織放射性計數比值(T/NT);進行Na131I及99mTcO4-顯像，觀察比較移植瘤的顯像情況，分析瘤體與對側相應部位正常軟組織的比值(T/B)。
　　 結果：
　　 1.本研究成功擴增出Egr-1啟動子，并成功構建出重組質粒Egr-1-hNIS/pcDNA3，經酶切電泳鑒定正確。
　　 2.Egr-1-hNIS/pcDNA3和FL*-hNIS/pcDNA3質粒成功轉染入Hela細胞中，流式細胞儀分別

5、篩選出hNIS表達效率最高的穩(wěn)定細胞株，表達率分別為11.2%和10.14%。RT-PCR結果示Hela-Egr-1-hNIS組及陽性對照組均有hNIS基因表達，陰性對照組無表達。
　　 3.碘攝取實驗示Hela-Egr-1-hNIS細胞和Hela-FL*-hNIS細胞攝碘能力比陰性對照Hela細胞分別提高了13倍和21倍，且攝碘能力均能被NaClO4抑制。Hela-Egr-1-hNIS細胞輻照后的攝碘能力增加，大致呈劑量依賴性

6、；輻照后的碘流出無明顯變化。131I體外治療實驗示Hela-Egr-1-hNIS、Hela-FL*-hNIS和Hela的克隆形成率分別為(50.49±9.75)%、(6.70±1.57)%和(86.32±6.56)%。
　　 4.Hela-Egr-1-hNIS細胞荷瘤裸鼠模型Na125I體內分布實驗示移植瘤可明顯聚集Na125I，1～12h期間腫瘤組織的%ID/g明顯高于除甲狀腺和胃以外的各組織臟器，T/NT值在3h時基本達到最

7、高值。Na131I顯像示移植瘤部位明顯濃聚放射性，T/B值在4h時最高，為4.05。99mTc04-顯像示移植瘤部位放射性持續(xù)濃聚至48h，T/B值在19h達最高值9.13。兩種顯像各時間點T/B值均高于陽性對照組。
　　 結論：
　　 1.成功建立了Egr-1啟動子調控的穩(wěn)定表達hNIS蛋白的Hela-Egr-1-hNIS細胞系，該細胞系具有較強的攝碘功能，且具有一定的輻射誘導作用。
　　 2.Hela-Egr