1、研究背景：癌癥是一種嚴重影響公眾健康的疾病，而乳腺癌則是女性中最常見的癌癥。據(jù)統(tǒng)計，美國2011年新增乳腺癌病理230，480例，占新發(fā)癌癥總數(shù)的30％，死亡39，520例，占總死亡數(shù)的15％。近年來，我國乳腺癌發(fā)病率逐年上升，已躍升為一些大城市女性腫瘤的第一位，并呈現(xiàn)年輕化的趨勢。由此可見，乳腺癌的預防、治療及研究是迫在眉睫的任務。研究乳腺癌相關發(fā)病基因及其作用機理，是尋找新的診斷及治療靶點的一個重要方面。
　　 染色質重塑及

2、DNA解旋酶蛋白5(chromodomain helicase DNA bindingprotein5，CHD5)是2003年發(fā)現(xiàn)的一個新基因。Bagchi等人對小鼠模型的研究證實，Chd5基因可以促進小鼠細胞凋亡，抑制細胞增殖及轉化，從而發(fā)揮抑癌基因的功能。此外，CHD5基因所在的人類染色體1p36區(qū)，在多種癌癥包括乳腺癌中均發(fā)生缺失，提示CHD5在乳腺癌的發(fā)生及進展過程中可能也發(fā)揮抑癌基因的功能。
　　 研究內容：我們運用R

3、CR擴增及測序的方法檢測了55個乳腺癌樣品中CHD5基因編碼區(qū)及外顯子兩側剪切位點的突變情況；運用實時定量PCR(real-time PCR)的方法檢測了44個乳腺癌樣品中CHD5基因拷貝數(shù)的變化情況；運用亞硫酸氫鈉處理及克隆測序的方法檢測了39個乳腺癌樣品中CHD5基因啟動子區(qū)的甲基化情況；分別運用實時定量PCR及免疫組織化學染色(immunohistochemical(IHC)staining)的方法檢測了90個乳腺癌樣品中CHD5

4、基因mRNA的表達以及289個乳腺癌樣品中CHD5蛋白的表達變化。此外，我們通過細胞及動物實驗，研究了CHD5基因在體外及體內對細胞增殖的影響，及其在體外對細胞浸潤的影響。并初步探討了乳腺癌中CHD5發(fā)揮其功能的分子機制。
　　 研究結果：CHD5基因在乳腺癌中很少發(fā)生突變，我們只在MDA-MB-231乳腺癌細胞系中檢測到一個移碼突變，該突變位于CHD5染色質解旋酶/ATP酶結構域。CHD5基因拷貝數(shù)有頻繁的半合性缺失，而且其基

5、因啟動子區(qū)頻繁發(fā)生高甲基化，導致乳腺癌樣品中CHD5 mRNA表達水平顯著下降。去甲基化試劑處理可顯著增加CHD5 mRNA在乳腺癌細胞系中的表達。乳腺癌臨床樣本中，CHD5 mRNA表達下調和淋巴結轉移顯著相關(P=0.026)。免疫組化分析顯示，CHD5蛋白表達水平在乳腺癌樣本中顯著降低，而且其表達下調和腫瘤高組織學級別(histological grade)、雌激素/孕激素陰性(ER/PR-negative)、HER2陽性(HER

6、2-positive)以及乳腺癌遠端轉移呈顯著相關(P≤0.01)。此外，CHD5表達下調或缺失的病人，其無病生存率(progression-free survival)及總生存率(overall survival)均顯著下降。從功能方面來看，CHD5可以抑制MDA-MB-231及Hs578T乳腺癌細胞在體外的增殖，減慢細胞周期進程，并可抑制MDA-MB-231細胞在裸鼠體內的成瘤。CHD5還可抑制MDA-MB-231及Hs578T乳腺