1、本課題擬從難治性癲癇模型腦內(nèi)表達(dá)PGP、MRP，以及PGP、MRP對抗癲癇藥物通過大鼠血腦屏障的影響入手，旨在從形態(tài)和功能兩個角度研究PGP、MRP在難治性癲癇多藥耐藥機(jī)制中的作用。本文共分兩部分。第一部分采用腦室內(nèi)注射KA癲癇模型，RT-PCR實驗比較空白對照組、假模型組、KA注射后6小時組、KA注射后24小時組、KA注射后1周組，大鼠大腦皮層和海馬PGPmRNA、MRPmRNA表達(dá)有何差異。免疫組織化學(xué)實驗比較空白對照組、假模型組、

2、KA注射后6小時組、KA注射后24小時組、KA注射后1周組，大鼠大腦皮層和海馬PGP、MRP蛋白水平的表達(dá)。第二部分首先采用微透析技術(shù)和高效液相色譜技術(shù)，通過腹腔注射卡馬西平20mg/kg和40mg/kg，研究卡馬西平在大鼠皮層和海馬內(nèi)的藥代動力學(xué)變化；通過腹腔注射苯妥英鈉50mg/kg和100mg/kg，研究苯妥英鈉在大鼠皮層和海馬內(nèi)的藥代動力學(xué)變化。接下來仍采用微透析技術(shù)結(jié)合高效液相色譜技術(shù)，選擇卡馬西平20mg/kg和苯妥英鈉50

3、mg/kg腹腔注射，通過微透析探針腦內(nèi)局部給予PGP拮抗劑維拉帕米，比較有無維拉帕米時大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞外液中卡馬西平和苯妥英鈉的藥物濃度。通過微透析探針腦內(nèi)局部給予MRP拮抗劑丙磺舒，觀察比較有無丙磺舒時大鼠皮層神經(jīng)元細(xì)胞外液中卡馬西平和苯妥英鈉的藥物濃度。最后研究得出結(jié)論：1、腦室內(nèi)注射KA導(dǎo)致動物出現(xiàn)癲癇發(fā)作，癲癇發(fā)作將引起動物模型皮層內(nèi)PGP和MRP表達(dá)增加。2、PGP和MRP具有限制卡馬西平和苯妥英鈉通過血腦屏障的作用，引起大