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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:人類繁衍生息的基礎(chǔ)是生殖,生殖健康是人類健康的核心。近年來(lái),男性生殖系統(tǒng)發(fā)病率逐年升高,男性生殖健康問(wèn)題備受關(guān)注,是現(xiàn)在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的重點(diǎn)。藏醫(yī)藥有數(shù)千年的悠久歷史,它是藏族勞動(dòng)人民同疾病作斗爭(zhēng)積累起來(lái)的經(jīng)驗(yàn)和理論總結(jié),從藏藥中尋找天然、安全,并且能調(diào)節(jié)生殖功能的藥物對(duì)人類的生殖健康有重要意義。
本課題以藏藥魯堆多吉(藏黨參)——長(zhǎng)花黨參(CodonopsisthalictrifoBa Wall.Var.mollis(C
2、hipp)L.T.Shen)為研究對(duì)象,觀測(cè)藏黨參水提物對(duì)雄性幼齡大鼠和成齡大鼠生殖系統(tǒng)的作用,用血清藥理學(xué)方法研究藏黨參水提物對(duì)睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌功能的影響及其機(jī)制途徑。為開發(fā)藏黨參提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
方法:用藏黨參水提物和潞黨參水提物灌胃幼齡大鼠和成齡大鼠,兩周后,測(cè)量大鼠體重,精子密度,睪丸、附睪、精囊重量的變化;用放射免疫法檢測(cè)大鼠血清睪酮(T)的變化,用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)大鼠血清雙氫睪酮(DHT)、卵泡
3、刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)的變化。
用高效液相色譜法分析對(duì)照組、藏黨參給藥組和潞黨參給藥組大鼠血清之間的化學(xué)成分的差異,以及藏黨參水提物和潞黨參水提物之間化學(xué)成分的差異。
建立大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù),然后用血清藥理學(xué)的方法研究藏黨參含藥血清和潞黨參含藥血清對(duì)大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮分泌功能的影響,并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探究。
結(jié)果:灌胃大鼠兩周后,藏黨參水提物和潞黨參水提物的低劑量組(10g/
4、Kg)、中劑量組(20g/Kg)和高劑量組(40g/Kg)能劑量依賴性地降低幼齡大鼠的睪丸重量、精子密度、血清睪酮(T)含量(P<0.05);低劑量組能顯著降低幼齡大鼠血清雙氫睪酮(DHT)含量(p<0.05);高劑量組能顯著降低幼齡大鼠的體重增加量(p<0.01);同時(shí)幼齡大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)濃度呈劑量依賴性顯著升高(p<0.05)。
灌胃大鼠兩周后,藏黨參水提物和潞黨參水提物的低劑量組(10g
5、/Kg)、中劑量組(20g/Kg)和高劑量組(40g/Kg)能劑量依賴性地降低成齡大鼠的體重增長(zhǎng)量、睪丸重量、附睪重量、精囊重量、精子密度、血清睪酮(T)和雙氫睪酮(DHT)含量(P<0.05);同時(shí)成齡大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)濃度呈劑量依賴性升高。
與對(duì)照組清的高效液相色譜圖對(duì)比發(fā)現(xiàn),藏黨參和潞黨參含藥血清均在280nm下約20min時(shí)出現(xiàn)一個(gè)顯著的小尖峰,這說(shuō)明給藥組大鼠血清中含有藥效物質(zhì)。藏黨參
6、和潞黨參水提液與含藥血清高效液相色譜圖相比在280nm下約20min時(shí)沒(méi)有出現(xiàn)一個(gè)顯著的小尖峰,提示血清藥效物為藏黨參和潞黨參水提液中的代謝成分。
睪丸間質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)排斥實(shí)驗(yàn)和睪酮的基礎(chǔ)分泌都證明了本實(shí)驗(yàn)離體大鼠的睪丸間質(zhì)細(xì)胞的功能良好,結(jié)果顯示離體培養(yǎng)24h細(xì)胞活率仍高達(dá)95%。
隨著含藥血清添加量的增加,睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮的分泌能力逐漸降低。與空白對(duì)照組相比較,加入藏黨參含藥血清高于80μl時(shí)能顯
7、著抑制睪丸間質(zhì)細(xì)胞的睪酮分泌,睪丸間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度顯著降低(p<0.05);加入潞黨參含藥血清高于40μl時(shí)能使睪丸間質(zhì)細(xì)胞的睪酮分泌顯著降低,睪丸間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的cAMP濃度顯著降低(p<0.05)。
結(jié)論:藏黨參和潞黨參水提液中的成分能夠被雄性大鼠吸收,代謝形成藏黨參和潞黨參的血清藥效物質(zhì),從而對(duì)雄性大鼠生殖系統(tǒng)產(chǎn)生藥理作用。
藏黨參和潞黨參血清中的藥效成分可能通過(guò)cAMP信號(hào)傳導(dǎo)途徑抑制睪酮的合成。
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