SSR標(biāo)記技術(shù)在小麥遺傳多樣性研究中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、目前,全球范圍內(nèi)育種種質(zhì)資源減少加速,生物多樣性減少?lài)?yán)重,其后果不僅使作物產(chǎn)量和品質(zhì)改良的工作難度加大,而且使作物對(duì)環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力減弱,因此對(duì)小麥的遺傳多樣性展開(kāi)研究和保護(hù)變得非常重要。目前,已經(jīng)在表型水平、生化水平、分子水平等方面展開(kāi)了對(duì)小麥品種多樣性的研究和改良。
  小麥?zhǔn)俏覈?guó)最重要的商品糧食和戰(zhàn)略性糧食儲(chǔ)藏品種,可以作為多種主食和副食原料,小麥生產(chǎn)關(guān)乎21世紀(jì)中國(guó)16億人口的糧食安全的重大問(wèn)題,世界糧食安全也面臨緊急狀

2、態(tài),做好小麥的基礎(chǔ)研究工作從某些角度來(lái)說(shuō)有助于穩(wěn)定世界糧食供給穩(wěn)定。對(duì)小麥遺傳多樣性的研究,有助于小麥種質(zhì)資源的收集、評(píng)價(jià)與保存;有助于雜交小麥中的親本選配。遺傳多樣性是生物多樣性的重要組成部分。種內(nèi)遺傳多樣性越豐富,物種對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力也就越強(qiáng),育種成效的貢獻(xiàn)也越大。由于現(xiàn)代育種技術(shù)的不科學(xué)發(fā)展,農(nóng)作物品種基因流失,極大地降低了農(nóng)作物的遺傳多樣性,狹窄的遺傳基礎(chǔ)不僅限制了作物產(chǎn)量和品質(zhì)的進(jìn)一步改良,而且使作物對(duì)生物性和非生物性環(huán)境

3、脅迫的脆弱性增加。遺傳多樣性的表達(dá)是通過(guò)大量基因的重新組合或改變來(lái)實(shí)現(xiàn)的,只有充分了解作物的遺傳多樣性,才能有目的種質(zhì)創(chuàng)新和作物改良工作,使遺傳多樣性保護(hù)與利用為人類(lèi)社會(huì)的發(fā)展做出貢獻(xiàn)。通過(guò)對(duì)農(nóng)作物遺傳多樣性的研究,能夠?yàn)檗r(nóng)作物遺傳資源考察收集的取樣、物種和變種的分類(lèi)、農(nóng)作物品種的演化過(guò)程、遺傳資源核心種質(zhì)的建立提供理論依據(jù),加速育種進(jìn)程,使糧食生產(chǎn)步入更加科學(xué)合理和可持續(xù)發(fā)展的軌道上來(lái)。綜上所述,非常有必要對(duì)我國(guó)小麥的遺傳多樣性展開(kāi)綜

4、合性的研究。
  目前遺傳多樣性的研究可從農(nóng)藝數(shù)量性狀、生化標(biāo)記、以及直接檢測(cè)DNA水平的分子標(biāo)記等方面入手。分子標(biāo)記技術(shù)一種通過(guò)直接檢測(cè)DNA分子堿基序列變異程度來(lái)鑒別研究材料的一種新型遺傳標(biāo)記。
  SSR分子標(biāo)記具有高多態(tài)性、多等位性、共顯性、分類(lèi)學(xué)專(zhuān)化性、穩(wěn)定性好、操作技術(shù)簡(jiǎn)單等特點(diǎn),是十分有用的遺傳標(biāo)記,目前已廣泛應(yīng)用于動(dòng)、植物遺傳圖譜構(gòu)建、系統(tǒng)發(fā)育和遺傳多樣性研究、品種及基因型鑒定、目的基因及QTL的標(biāo)記和標(biāo)記輔

5、助選擇育種等研究,故采取此分子標(biāo)記方法來(lái)對(duì)小麥資源的多樣性進(jìn)行研究。
  本項(xiàng)研究試圖利用分子生物學(xué)技術(shù),通過(guò)SSR分子標(biāo)記,對(duì)西北春麥區(qū)、青藏春冬麥區(qū)、新疆冬春麥區(qū)、北方春麥區(qū)、東北春麥區(qū)、華南冬麥區(qū)、西南冬麥區(qū)、長(zhǎng)江中下游冬麥區(qū)、北方冬麥區(qū)、黃淮東麥區(qū)這十個(gè)麥區(qū)共計(jì)60份小麥樣品的不同地方品種進(jìn)行遺傳多樣性分析,以期探究我國(guó)小麥地方品種之間遺傳多樣性,測(cè)量各個(gè)地方品種之間的遺傳距離,并為小麥育種工作提供參考資料和理論基礎(chǔ)。

6、r>  本實(shí)驗(yàn)通過(guò)DNA序列數(shù)據(jù)庫(kù)篩選小麥染色體上的SSR位點(diǎn),再根據(jù)SSR兩側(cè)序列在同一物種內(nèi)高度保守的特性,設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物來(lái)擴(kuò)增這60份小麥葉片的SSR序列,再經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳、染色,通過(guò)比較譜帶的相對(duì)遷移距離和出現(xiàn)的譜帶數(shù)據(jù)特征,得到該品種在某個(gè)SSR座位上的多態(tài)性信息。
  本試驗(yàn)利用23對(duì)SSR引物,共擴(kuò)增到96個(gè)不同片段大小的產(chǎn)物,平均每對(duì)4.6個(gè)產(chǎn)物。其中,產(chǎn)生片段條數(shù)較多且條帶非常清晰的引物為分別定位在5A

7、、5B、6A、6D染色體的xgwm499、xgdm98、xgwm334、xgwm186,其中,定位在6A染色體上的引物xgwm334帶數(shù)最多達(dá)到了19條,本試驗(yàn)所用的引物擴(kuò)增的條帶超過(guò)4條的引物占到了引物總數(shù)的48%,且有23個(gè)引物顯示了多態(tài)性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果很好地展示了該試驗(yàn)方法的高靈敏度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了SSR標(biāo)記確系研究小麥種質(zhì)遺傳差異的有效分子標(biāo)記之一。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明我國(guó)的小麥地方品種有著極其豐富的遺傳多樣性,其GD值變異范圍為0.26

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