1、菊花(DendranthemaXgrandiflorum(Kamat)Kitam)起源于中國(guó)，是我國(guó)十大傳統(tǒng)名花和世界四大鮮切花之一。菊花品種繁多，種下變異極為豐富，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。中國(guó)栽培菊花大約有3000個(gè)品種，具有悠久的栽培歷史，株型、葉片、花色、花瓣(小花)形態(tài)等都有非常豐富的變化。如此眾多的品種和變異式樣給品種的分類、鑒定和品種權(quán)的保護(hù)帶來(lái)極大困難。AFLP(擴(kuò)增片斷長(zhǎng)度多態(tài)性)是一種新的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，具有豐富的多態(tài)

2、性、較好的穩(wěn)定性和較高的個(gè)體特異性，廣泛應(yīng)用于品種鑒定、遺傳多樣性分析、遺傳圖譜構(gòu)建、基因定位等方面。本試驗(yàn)在建立較穩(wěn)定的菊花AFLP技術(shù)體系基礎(chǔ)上，構(gòu)建了26份菊花材料的圖譜，分析了其遺傳多樣性，以期為菊花品種鑒定、親緣關(guān)系分析、高密度遺傳圖譜構(gòu)建、核心種質(zhì)構(gòu)建等奠定基礎(chǔ)。 本文采用改良常規(guī)CTAB法提取菊花基因組DNA。其提取液成份為：100mmol/LTris-HCL(pH 8.0)，20mmol/LEDTA，1.4 mo

3、l/LNaCl，2％CTAB，2％PVP<,40>，50 mmol/L β-巰基乙醇，粗提后的DNA經(jīng)RNase除去RNA：苯酚/氯仿抽提一次，氯仿/異戊醇抽提一次，去除蛋白質(zhì)，DNA降解少，無(wú)蛋白質(zhì)和RNA，獲得了高質(zhì)量的擴(kuò)增模板。在此基礎(chǔ)上，得到清晰的菊花AFLP圖譜，從而建立了最佳的菊花AFLP反應(yīng)體系。 利用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)研究26個(gè)菊花品種的遺傳多樣性，從64對(duì)引物中篩選出的7對(duì)AFLP選擇性引物對(duì)菊花種質(zhì)資源進(jìn)行

4、了AFLP分析，都得到了清晰的圖譜，表明這些引物用于菊花AFLP分析是可行的。7個(gè)引物組合共擴(kuò)增出389條帶，其中多態(tài)性條帶294條，多態(tài)性占75.54％，平均每個(gè)引物組合擴(kuò)出多態(tài)性條帶42.0條，每一個(gè)引物組合都可將26個(gè)品種完全分開。說(shuō)明菊花存在豐富的遺傳變異，遺傳多樣性水平很高。 另一方面使用NTSYS2.0軟件，通過(guò)UPGMA法對(duì)所得的多態(tài)性標(biāo)記進(jìn)行聚類分析，獲得聚類樹狀圖，其相似系數(shù)為0.61～0.85之間，結(jié)果表明2