振動(dòng)對(duì)體外培養(yǎng)IgA腎病人腭扁桃體細(xì)胞產(chǎn)生BAFF及低糖期貨IgA1的影響.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究振動(dòng)對(duì)體外培養(yǎng)IgA腎病和慢性扁桃體炎患者腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞產(chǎn)生BAFF、IgA1及其異常糖基化的影響。
  方法:收集14例IgA腎病組(IgA nephropathy,IgAN組)患者和12例慢性扁桃體炎組(Chronic tonsillitis,CT組)患者腭扁桃體組織,其中慢性扁桃體炎組包括睡眠呼吸暫停綜合征患者,本組均無(wú)尿檢異常及腎臟病變。分離人腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞,培養(yǎng)24小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞恢復(fù)細(xì)胞活性狀態(tài),然后分

2、為6組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。A組直接分離培養(yǎng)上清及留取細(xì)胞作為基礎(chǔ)值,B組不給予振動(dòng)刺激作為對(duì)照組,C組給予1分鐘振動(dòng)刺激,D組給予3分鐘振動(dòng)刺激,E組給予5分鐘振動(dòng)刺激,F(xiàn)組給予10分鐘振動(dòng)刺激,B~F組繼續(xù)培養(yǎng)72小時(shí)后收集培養(yǎng)上清及細(xì)胞。用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IgA1蛋白的含量及異常糖基化IgA1的水平,Real time-PCR檢測(cè)細(xì)胞B淋巴細(xì)胞刺激因子(B-cell-activation factor,BAFF) BAFF、β1,3

3、-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(coreβ1,3-galactosyltrans ferase,C1GALT1)、分子伴侶(coreβ1,3GalT-specific molecular chaperone,Cosmc)的基因表達(dá),分別比較振動(dòng)對(duì)IgAN組和CT組的影響以及不同振動(dòng)時(shí)間的差異。
  結(jié)果:
  1.未給予振動(dòng)刺激時(shí),IgAN組患者腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞IgA1含量、異常糖基化IgA1的水平和BAFF mRNA的表達(dá)水平均高于C

4、T組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001); IgAN組患者腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞C1GALT1和Cosmc mRNA的表達(dá)水平均低于CT組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.001)。
  2.IgAN組患者腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)振動(dòng)刺激后,IgA1含量、異常糖基化IgA1的水平和BAFF mRNA的表達(dá)水平均高于未刺激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),C1GALT1和CosmcmRNA的表達(dá)水平低于未刺激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p值均<0.

5、05)。CT組患者腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)振動(dòng)刺激后,BAFF mRNA的表達(dá)水平升高(p<0.05),但I(xiàn)gA1含量、異常糖基化IgA1的水平及C1GALT1和CosmcmRNA的表達(dá)水平無(wú)明顯差異(p>0.05)。
  3.給予振動(dòng)刺激1分鐘后,IgAN組和CT組腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞BAFF基因的表達(dá)均有一定程度的升高,且升高程度無(wú)差異,這種升高可引起IgAN組IgA1分泌的增加,而CT組IgA1分泌無(wú)變化。隨著振動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng),CT

6、組BAFF的表達(dá)不再升高,且IgA1含量無(wú)變化,而IgAN組BAFF的表達(dá)再次明顯升高,且升高程度大于CT組,IgA1的分泌也顯著增加。但I(xiàn)gAN組腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞C1GALT1和Cosmc mRNA的表達(dá)在不同時(shí)間振動(dòng)刺激各組間無(wú)明顯差異。
  4.Pearson相關(guān)性分析顯示:IgAN組腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞C1 GALT1和Cosmc mRNA表達(dá)量與IgA1異常糖基化水平均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.5867,p=0.001;r

7、=-0.5031,p=0.003),BAFF mRNA的表達(dá)量與IgA1含量呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.5037,p=0.012)。
  結(jié)論:給予體外培養(yǎng)的人腭扁桃體單個(gè)核細(xì)胞振動(dòng)刺激,可導(dǎo)致IgAN組和CT組BAFF基因的表達(dá)升高,振動(dòng)超過(guò)1分鐘后IgAN組BAFF升高的程度大于CT組。IgAN組振動(dòng)可引起IgA1分泌增加,并通過(guò)抑制C1GALT1和Cosmc的基因表達(dá)來(lái)干擾IgA1的糖基化過(guò)程,使IgA1異常糖基化水平升高,即Ig

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