1、目的：研究優(yōu)化核酸疫苗對慢性帕金森病小鼠蛋白酶體免疫保護作用機制。
　　方法：將雄性C57BL/6J小鼠隨機分為PBS模型組、空質粒組和優(yōu)化核酸疫苗和疫苗加蛋白酶體抑制劑組。給予MPTP，制備慢性MPTP小鼠模型。然后分別在小鼠后肢脛前肌注射PBS、空質粒pVAX1、pVAX1-IL4/SYN-B和pVAX1-IL4/SYN-B核酸疫苗各100ul,共三次。最后一次注射后，于左側前腦束（iMFB）區(qū),立體注入乳胞素（lactacy

2、stin）.3周后觀察動物行為學，免疫組化（Immunohistochemistry IHC)和western blot(WB)測酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase TH）；同時western blot測泛素(ubiquitin)、突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn)及20S蛋白酶體（20S proteasome）的表達；免疫熒光雙標測突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn)和20

3、S蛋白酶體（20S proteasome）突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn)和泛素(ubiquitin)共定位及熒光強度情況。
　　結果：
　　1.行為學：發(fā)現(xiàn)核酸疫苗組較PBS組、空質粒組和疫苗乳胞素組的運動癥狀明顯改善，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）
　　2.TH的IHC和WB結果：核酸疫苗組較PBS組、空質粒組和疫苗乳胞素組的中腦黑質多巴胺神經元中TH陽性數(shù)目明顯增多，具有統(tǒng)計學意義（P＜0

4、.05）
　　3.WB結果:核酸疫苗組較PBS組、空質粒組和疫苗乳胞素組的20S蛋白酶體（20S Proteasome）蛋白表達量明顯增加，突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn）蛋白量明顯減少，具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；同時優(yōu)化核酸疫苗組與模型組、空質粒及乳胞素組相比泛素（ubiquitin）明顯減少。
　　4.免疫熒光雙標：突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn）分別和泛素（ubiq

5、uitin）及20S蛋白酶體（20S Proteasome）在中腦黑質的多巴胺神經元共定位表達；優(yōu)化核酸疫苗明組顯減少突觸核蛋白（Alpha-synuclein a-syn）和泛素（ubiquitin）熒光強度與帕金森病模型組相比；優(yōu)化核酸疫苗組明顯增加20S蛋白酶體（20S Proteasome）熒光強度與模型組相比。
　　結論：研究結果表明：優(yōu)化核酸疫苗主動免疫慢性MPTP帕金森病小鼠模型，產生高效抗體，抗原抗體復合物激活溶酶