人脂聯(lián)素球狀結(jié)構(gòu)域（gAd）基因的克隆、表達、純化及活性的測定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文人脂聯(lián)素球狀結(jié)構(gòu)域（gAd）基因的克隆、表達、純化及活性的測定姓名：楊澤華申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：解軍楊琦20050518山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果構(gòu)建了pBV220一gad質(zhì)粒表達載體，經(jīng)DNA測序鑒定序列的正確。SDS—PAGE電泳表明在大腸桿菌DH5a和JMl09中成功表達出gAd因子，在DH5a中表達量更高，表達量約占全菌蛋白的20％。經(jīng)動物實驗證實初步復(fù)性的gad蛋白因子

2、與對照組相比有降低血糖和游離脂肪酸的活性。同時構(gòu)建了pBV220一gad融合表達載體SDS—PAGE電泳和Western—blotting結(jié)果表明在大腸桿菌DH5a中成功表達出gad融合蛋白，用Ni2NTA樹脂柱純化后獲得gAd融合蛋白經(jīng)SDS—PAGE顯示單一條帶。結(jié)論應(yīng)用基因工程技術(shù)，成功構(gòu)建了pBV220一gad質(zhì)粒表達載體，表達出的gad因子具有降低血糖和游離脂肪酸的活性，同時構(gòu)建了pBV220一gad融合表達載體，獲得gAd融

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