1、研究背景: 偏頭痛（Migraine）為發(fā)作性神經-血管功能障礙，以反復發(fā)作的一側或雙側頭痛為特征。其發(fā)病機制復雜，目前仍未闡明，研究認為三叉神經血管系統(tǒng)激活導致硬腦膜無菌性炎癥是偏頭痛發(fā)病機制的關鍵環(huán)節(jié)。 Rho激酶是Rho蛋白下游最主要的靶效應分子，包括兩種形式ROCKⅠ和ROCKⅡ，其中ROCKⅡ主要在中樞神經系統(tǒng)表達。Rho/ROCK通路在慢性疼痛的發(fā)展和維持中起著重要作用。有研究表明，在腫瘤、高血壓等相關疾病

2、中發(fā)現(xiàn)Rho-NF-κB軸的存在，Rho激酶抑制劑能抑制NF-κB的激活。 核因子-kappaB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）是細胞內普遍存在的一種介導細胞內信號傳遞的快反應轉錄因子，可調控多種基因的表達。有研究發(fā)現(xiàn)，在硝酸甘油大鼠偏頭痛模型中，NF-κB在三叉神經尾核和三叉神經分布的硬腦膜處有增強表達，提示核因子-kappaB在偏頭痛神經源性炎癥的產生和偏頭痛發(fā)作的過程中起著重要的作用，值得我們深入

3、研究。 環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase，COX-2）為誘導型環(huán)氧合酶，又稱“炎癥反應基因”，在正常生理狀態(tài)下表達量很小，在受到刺激后便迅速合成表達，參與炎癥相關病理生理過程。COX-2是被NF-κB調控的轉錄物質。應用COX-2抑制劑可以通過抑制中樞致敏作用達到終止偏頭痛的作用。 目的: 本研究將從ROCKⅡ、核因子-kappaB及COX-2著手，首先建立硝酸甘油型實驗性偏頭痛大鼠模型，并同步設立生理鹽

4、水對照組，通過檢測腦干組織中上述各蛋白的表達，并比較它們在發(fā)作期與間歇期的表達變化，以初步探討ROCKⅡ、NF-kappaB通路及COX-2在偏頭痛發(fā)病過程中的作用。 方法: 1.動物分組及處理：采用清潔級成年雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠為實驗對象，隨機分為模型組和對照組。模型組依Tassorelli法皮下注射硝酸甘油10mg（2ml）/kg，每周1次，共5周；對照組以生理鹽水代替硝酸甘油皮下注射，同步進

5、行。 2.受試動物于第5次造模后2小時（發(fā)作期）或第4天（間歇期）分別斷頭處死，取大鼠腦干組織，液氮內保存。 3.Western-Blot法檢測大鼠腦干組織ROCKⅡ、核因子-kappaB及COX-2蛋白的表達。 結果: 1.模型組發(fā)作期大鼠腦干組織中ROCKⅡ蛋白、核因子-kappaBp65、COX-2蛋白的表達均高于各自的間歇期和對照組（p<0.05）；模型組間歇期與對照組間表達無明顯差異（p>0.0

6、5）。 2.模型組間歇期與模型組發(fā)作期ROCKⅡ蛋白變化量與NF-κBp65蛋白變化量呈低度負相關（r=-0.0040，p<0.05），而NF-κBp65蛋白的變化量與COX-2蛋白的變化量呈顯著正相關（r=0.5098，p<0.05）。 結論: 1.ROCKⅡ蛋白、COX-2蛋白表達的上調及NF-κB的活化可能偏頭痛的發(fā)生有關。 2.偏頭痛的發(fā)生中，COX-2蛋白的表達上調可能受核因子-kappaB蛋白