1、目的:觀察健骨方對膝骨關節(jié)炎模型兔的關節(jié)軟骨形態(tài)學與組織學改變、軟骨細胞分泌基質金屬蛋白酶-1(MMP-1)、基質金屬蛋白酶-3(MMP-3)、特異性組織基質金屬蛋白酶抑制因子(TIMP-1)、白細胞介素-1β(IL-1β)的作用及對軟骨細胞凋亡指數(AI)與增殖指數(PI)的不同影響;健骨方治療膝骨關節(jié)炎的臨床療效觀察,為探討中藥療效的作用機制及臨床用藥提供依據。方法:實驗研究:將35只新西蘭兔隨機分7組,正常對照組,模型對照組,補腎

2、組,活血化瘀組,清熱利濕組,祛風勝濕組,補腎活血解毒組,前兩組給予生理鹽水,后五組分別給予左歸丸,失笑散,四妙散,豨桐丸,健骨方。飼養(yǎng)8周后大體觀察關節(jié)結構一般表現(xiàn),光鏡下觀察形態(tài)學變化并檢測軟骨、滑膜中MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1β的表達陽性情況,MMP-3、TIMP-1平均灰度的檢測,軟骨細胞的凋亡指數和增殖指數。臨床觀察:將60例膝骨關節(jié)炎患者隨機分為試驗組和對照組,試驗組30例服用健骨方,對照組30例服用硫酸氨

3、基葡萄糖,兩組療程均為6個月。結果:實驗研究:光鏡下觀察形態(tài)學變化:據Mankin’s評分標準,對光鏡下關節(jié)軟骨及滑膜的退變程度評分,模型對照組評分明顯高于正常對照組(P＜0.05),表明建模成功;健骨方組、失笑散組、豨桐丸組、四妙散組、左歸丸組評分分別與模型對照組比較均有降低(P＜0.05),表明以上各組可以通過降低評分來改善軟骨病變;健骨方組評分分別與其他各中藥組比較均有降低(P＜0.05),表明健骨方組在降低評分改善軟骨病變方面優(yōu)

4、于其他各中藥組。光鏡下觀察組織學變化:左歸丸組,失笑散組,四妙散組,豨桐丸組、健骨方組中關節(jié)軟骨、滑膜中MMP-1、MMP-3、IL-1β陽性表達較模型對照組均降低,健骨方組降低較為明顯;左歸丸組,失笑散組,四妙散組,豨桐丸組、健骨方組中關節(jié)軟骨、滑膜中TIMP-1陽性表達較模型對照組均有升高,健骨方組升高較為明顯。軟骨、滑膜中MMP-3平均灰度方面:模型對照組與正常對照組比較均數增高(P＜0.05),表明建模成功;健骨方組、左歸丸組、

5、四妙散組、失笑散組、豨桐丸組分別與模型對照組比較均數降低(P＜0.05),表明以上各組可以通過降低軟骨細胞中MMP-3平均灰度來改善軟骨病變;健骨方組分別與其他各中藥組比較均數降低(P＜0.05),表明健骨方組在降低軟骨細胞中MMP-3平均灰度方面優(yōu)于其他各中藥組。軟骨、滑膜中TIMP-1平均灰度方面:模型對照組與正常對照組比較均數增高(P＜0.05),表明建模成功;健骨方組、左歸丸組、四妙散組、失笑散組、豨桐丸組與模型對照組比較均數增

6、高(P＜0.05),表明以上各組可以通過增高軟骨細胞中TIMP-1而改善軟骨病變;健骨方組與其他各中藥組比較均數增高(P＜0.05),說明健骨方組在增高軟骨細胞中TIMP-1平均灰度方面優(yōu)于其他各中藥組。軟骨細胞的增殖指數方面:模型對照組與正常對照組比較均數降低(P＜0.05),表明建模成功;健骨方組與模型對照組比較均數增高(P＜0.05),表明健骨方可以通過刺激軟骨細胞的增值而改善軟骨病變;其他各中藥組分別與模型對照組比較均數增高,但

7、差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。軟骨細胞的凋亡指數方面:模型對照組與正常對照組比較均數增高(P＜0.05),表明建模成功;健骨方組、失笑散組、豨桐丸組與模型對照組比較均數均有降低(P＜0.05),表明以上各組可以降低軟骨細胞凋亡指數來改善軟骨病變;四妙散組、左歸丸組與模型對照組比較均數降低,但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);健骨方組分別與其他各中藥組比較均數降低(P＜0.05),表明健骨方組在降低軟骨細胞凋亡指數方面明顯優(yōu)于其他各中

8、藥組。臨床觀察:治療后,中醫(yī)癥候積分和病情輕重方面,試驗組與對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),說明試驗組在改善中醫(yī)癥候和病情輕重方面優(yōu)于對照組;降低C反應蛋白(CRP)方面,兩組組內比較,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05),組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),說明在降低CRP方面兩組療效現(xiàn)當。結論:實驗研究顯示健骨方能改善軟骨及滑膜的退變程度計分,有效的降低關節(jié)軟骨MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1β陽性表