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![FAT10介導(dǎo)miR-34a對肝癌放療敏感性作用的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/57b785f7-ad78-48d5-a997-d26797e46935/57b785f7-ad78-48d5-a997-d26797e469351.gif)
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文檔簡介
1、目的:
通過RNA干擾特異性下調(diào)肝癌細胞HepG2及MHCC-97H中FAT10基因的表達,探討FAT10對miR-34a的調(diào)控及對肝癌細胞放療敏感性作用的影響。
方法:
1、將針對FAT10的siRNA轉(zhuǎn)染到肝癌細胞株HepG2和MHCC-97H中,通過熒光定量PCR和western blot檢測FAT10mRNA和蛋白的表達變化情況。
2、將細胞分成:control,siRNA(-),F(xiàn)AT1
2、0-siRNA,電離輻射(IR),IR+siRNA(-),IR+FAT10-siRNA六組,通過熒光定量PCR檢測miR-34a表達,Western blot檢測Bcl-2及Bax蛋白的表達變化。
3、繪制細胞生長曲線及流式細胞術(shù)檢測細胞周期和凋亡情況。
結(jié)果:
1、干擾FAT10后肝癌細胞的FAT10mRNA和蛋白的表達受到明顯抑制,
2、實時熒光定量PCR及Western blot結(jié)果顯示FA
3、T10-siRNA組、IR+siRNA(-)組和IR組的miR-34a表達明顯升高,Bcl-2的蛋白表達明顯降低,Bax蛋白表達明顯增高,而IR+FAT10-siRNA組表達變化更加明顯
3、流式細胞儀檢測表明干擾FAT10使細胞阻滯在G0/G1期,IR照射使細胞阻滯在G2/M期。并且干擾FAT10和IR都可誘發(fā)細胞凋亡,而IR+FAT10-siRNA組凋亡更為明顯。
結(jié)論:
干擾FAT10后miR-34a
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