1、第一部分: 雌、孕激素對人早孕蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中BAFFR表達(dá)影響的研究。 研究背景：妊娠后，蛻膜化的子宮內(nèi)膜和發(fā)育著的滋養(yǎng)層細(xì)胞共同構(gòu)成了母-胎界面。蛻膜基質(zhì)細(xì)胞（decidual stormal cells DSC）是蛻膜組織的主要組成成分，在維持母體界面的免疫耐受發(fā)揮重要作用。大量的研究已證實(shí)腫瘤壞死因子（TNF）超家族成員參與免疫豁免過程，在胎盤的增殖及分化中發(fā)揮重要作用。B淋巴細(xì)胞激活因子（B cells-activati

2、ng factor， BAFF）是TNF超家族的新成員，Phillips TA等發(fā)現(xiàn)BAFF表達(dá)于母-胎界面處，并證實(shí)胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞層BAFF/BAFFR系統(tǒng)有利于正常妊娠胎盤的自身穩(wěn)定、生長和重塑。在前期的研究中觀察到妊娠早期蛻膜組織表達(dá)BAFF，推測其可能與早孕期母-胎界面免疫耐受的形成有關(guān)。BAFFR是BAFF的特異性受體，關(guān)于其在蛻膜組織中表達(dá)的研究尚未見相關(guān)報(bào)道?；诖?，本研究擬觀察人早孕蛻膜基質(zhì)細(xì)胞（decidual stro

3、mal cells，DSC）中BAFFR的表達(dá)情況及雌、孕激素對其表達(dá)的的影響。 研究目的：觀察雌、孕激素對體外培養(yǎng)的人早孕蛻膜基質(zhì)細(xì)胞（decidual stromal cells，DSC）中B淋巴細(xì)胞刺激因子受體3（B cells-activating factor receptor3，BR3，也稱BAFFR）表達(dá)的影響，初步探討其在胚胎植入調(diào)控和母胎免疫平衡中的作用，為病理性妊娠的診療提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 研究方法：

4、選取正常早孕婦女人工流產(chǎn)蛻膜組織，分離、提純DSC，培養(yǎng)于含10％去激素胎牛血清培養(yǎng)基內(nèi)，分為雌二醇（Estradiol，E2）、孕酮（Progesterone，P4）、雌二醇孕酮聯(lián)合（E2+P4）和空白對照（Control，C）組，培養(yǎng)96h。MTT檢測細(xì)胞的增殖能力；real-time PCR檢測BAFFR mRNA；流式細(xì)胞術(shù)檢測BAFFR蛋白。 結(jié) 果：與空白對照組相比，各實(shí)驗(yàn)組DSC增殖能力及BAFFR mRNA水平均

5、無明顯變化（P>0．05）；流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示BAFFR蛋白定位于DSC胞內(nèi)，且E2+P4可顯著上調(diào)其表達(dá)（P<0．05）。 結(jié) 論：正常人早孕DSC表達(dá)高水平的BAFFR，雌孕激素聯(lián)合對其有顯著的上調(diào)作用，提示BAFFR可能參與胚胎植入的調(diào)控及早孕期母-胎界面的免疫調(diào)節(jié)，對臨床各種病理性妊娠如稽留流產(chǎn)，妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病，妊娠期高血壓等的防治具有重要的作用。 第二部分：雌、孕激素對人早孕蛻膜基質(zhì)細(xì)胞中Bcl-2/Bax表

6、達(dá)影響的研究。 研究背景：細(xì)胞凋亡在維持機(jī)體正常形態(tài)及功能方面起重要作用，胎盤組織中也存在著細(xì)胞凋亡。妊娠后，在子宮內(nèi)膜蛻膜化的過程中，內(nèi)膜細(xì)胞的分化和凋亡對妊娠免疫耐受和限制滋養(yǎng)細(xì)胞的過度侵襲具有重要的作用。因此，胎盤細(xì)胞凋亡與孕卵著床、胎盤形成和重構(gòu)關(guān)系密切，隨妊娠進(jìn)展，逐漸增加的胎盤細(xì)胞凋亡率，可能在胎盤發(fā)育和分化過程中發(fā)揮重要作用。但是，妊娠后DSC凋亡的具體機(jī)制仍不清楚。 細(xì)胞凋亡受多種基因產(chǎn)物的調(diào)控，如細(xì)胞因

7、子，白介素和甾體激素等。Bcl-2家族是細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因子，Bax作為此家族中一員，同Bcl-2作用相反，主要是促進(jìn)細(xì)胞的凋亡；有研究顯示Bcl-2/Bax系統(tǒng)有利于胚胎植入過程中局部免疫耐受形成，母體甾體激素可能參與調(diào)控胎盤凋亡過程，然而，目前在體外應(yīng)用雌、孕激素刺激蛻膜組織，探討其對蛻膜組織凋亡影響的研究較少。 研究目的：通過觀察雌、孕激素對體外培養(yǎng)的DSC凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表達(dá)的影響，初步探討其對早孕期子宮內(nèi)

8、膜容受性的調(diào)控作用，為病理性妊娠的診療提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。 方法和結(jié)果：選取正常早孕婦女人工流產(chǎn)蛻膜組織，分離、提純DSC，培養(yǎng)于含10％去激素胎牛血清培養(yǎng)基內(nèi)，分為雌二醇（Estradiol，E2）、孕酮（Progesterone，P4）、雌二醇孕酮聯(lián)合（E2+P4）和空白對照（Control，C）組，培養(yǎng)96h。MTT檢測細(xì)胞的增殖能力；流式細(xì)胞術(shù)檢測DSC的凋亡率和Bcl-2/Bax蛋白的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比各實(shí)驗(yàn)組

9、DSC增值能力無明顯差異（P>0．05），而雌孕激素聯(lián)合刺激DSC后可顯著上調(diào)其凋亡率和胞內(nèi)Bax的表達(dá)（P<0．05），但單一雌或孕激素刺激后DSC凋亡率和Bax表達(dá)無顯著性變化（P>0．05）；流式細(xì)胞術(shù)在各組DSC中均為檢測到Bcl-2的表達(dá)。 結(jié) 論：本研究結(jié)果表明雌孕激素聯(lián)合刺激DSC可能通過上調(diào)其Bax表達(dá)來促進(jìn)自身凋亡，此作用有利于妊娠早期子宮內(nèi)膜容受性的形成，為各種病理性妊娠的防治和提高體外受精胚胎移植（IVF-