1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文雌、孕激素對(duì)人宮頸癌細(xì)胞株Hela細(xì)胞體外生長的影響姓名：袁芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：王惠蘭;黃向華2003.3.1中文摘要3 分：0 分為不著色；1 分為著色淺，呈淡黃色；2 分為中度著色，呈深黃色；3 分為著色深，呈棕色／咖啡色。P i 代表每一著色程度的細(xì)胞所占的比例，為0 - 1 0 0 ％，H ．s c o r e = ∑P i ( i + 1 ) ，滿分為4 分。3 ．細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)：

2、取對(duì)數(shù)生長期的H e l a 細(xì)胞，制成濃度為3 ×1 0 1 個(gè)／m l 的單細(xì)胞懸液，接種到9 6 孔培養(yǎng)板，每孔2 0 0 u l ，過夜貼壁，4 。C 培養(yǎng)l h ，以促進(jìn)細(xì)胞同步化生長：換培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組根據(jù)加入藥物的不同分為E 2 組、P 組和E 2 + P 組，E 2 組分別加入含E 20 ．5 0 、1 ．0 0 、5 ．0 0 和1 0 ．0 0 n m o l ／L ( n M ) 的培養(yǎng)液，P 組分別加入含

3、P0 ．0 1 、0 ．1 0 、1 ．0 0 和1 0 ．0 0 u m o l ／L ( u M ) 的培養(yǎng)液，E 2 + P 組中E 2 和P 的終濃度分別同E 2 組、P組：對(duì)照組加入含O ．0 3 ％乙醇的培養(yǎng)液，每一濃度均設(shè)8 個(gè)復(fù)孔，繼續(xù)培養(yǎng)7 2 h 后，每孔加入2 0 u l 濃度為5 m g ／m l 的M T T 溶液，繼續(xù)孵育4 h 后吸凈上清液，每孔加入二甲亞砜2 0 0 u l ，振蕩1 0 m i n ，用

4、酶標(biāo)光度儀在波長為4 9 2 n m 時(shí)測定每孔的吸光度( 彳) 值，并計(jì)算抑制率( 抑制率= 對(duì)照組A 值一實(shí)驗(yàn)組A 值／對(duì)照組爿值) 。本實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。4 ．細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率的檢測：將濃度為3 ×1 0 4個(gè)／m l 的H e l a 單細(xì)胞懸液，接種于1 0 0 m l 培養(yǎng)瓶，過夜貼壁，同步化處理后換培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組取各組最大濃度，即E 2 組含E 2 為1 0 ．0 0 r d M ，P 組含P 為1 0 ．0