IL-24對人宮頸癌細(xì)胞株C33A細(xì)胞的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:以攜帶有目的基因IL-24的穿梭質(zhì)粒pAdtrackCMV轉(zhuǎn)染C33A細(xì)胞,觀察IL-24對人宮頸癌C33A細(xì)胞凋亡、體外增殖及遷移力的影響。 方法:將IL-24真核表達載體padtrack—cmv/IL-24和空載體padtrack—cmv分別用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的C33A細(xì)胞,以轉(zhuǎn)染空載體pAdtrackCMV的C33A細(xì)胞作為空載體對照,以C33A細(xì)胞作陰性對照,在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染熒光效應(yīng),用MTT法檢測細(xì)胞增

2、殖情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡指數(shù),細(xì)胞劃痕實驗觀察細(xì)胞遷移力變化。 結(jié)果: 1.IL-24組、空載體組及陰性對照組C33A細(xì)胞于熒光顯微鏡下觀察,可見IL-24組、空載體組大量細(xì)胞發(fā)綠色熒光,陰性對照組細(xì)胞未見綠色熒光。 2.IL-24組、空載體組及陰性對照組C33A細(xì)胞MTT比色法測定,三組之間的OD值差異有顯著性(P<0.001,P<0.001)。IL-24組OD值明顯低于空質(zhì)粒組和陰性對照組(P<0.05

3、),而空質(zhì)粒組和陰性對照組的OD值無明顯差異(P=0.993)。生長曲線圖中后兩者生長曲線相似,IL-24轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖受到明顯抑制。 3.流式細(xì)胞儀檢測未轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染空載體及轉(zhuǎn)染IL-24后的各組C33A細(xì)胞平均凋亡率分別為3.34%,3.37%,13.47%。三組C33A細(xì)胞凋亡細(xì)胞率的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,兩兩比較,IL-24組凋亡率與其他兩組有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001,P<0.001),IL-24組細(xì)胞早期凋亡率明顯高于空

4、質(zhì)粒組和陰性對照組,空載體組與陰性對照組比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.969),在周期檢測中,三個實驗組G0/G1、S、G2/M期細(xì)胞比例的總體差異均具有顯著性(G0/G1:F=77.491,P<0.001;S:F=8.008,P<0.05;G2/M:F=10.502,P<0.05)。與空質(zhì)粒組和陰性對照組相比,IL-24組G0/G1期細(xì)胞比率增多(PG0/G1<0.001),S期細(xì)胞比率減少(PS<0.05),G2/M期細(xì)胞減少(PG2/

5、M<0.05),而空質(zhì)粒組和陰性對照組無明顯差異(PG0/G1=0.485,PS=0.971,PG2/M=0.447)。 4.細(xì)胞劃痕實驗中,不同時間點鏡下比較IL-24組、空載體組及陰性對照組劃痕寬度變化,IL-24轉(zhuǎn)染組細(xì)胞遷移力受到抑制,劃痕愈合速度較慢。 結(jié)論: 1.IL-24基因可以將C33A細(xì)胞阻滯于G0/G1期,對C33A細(xì)胞的體外增殖,遷移有抑制作用; 2.IL-24基因有誘導(dǎo)C33A細(xì)胞

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