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![火龍果莖段組織再生體系建立與體細(xì)胞抗寒突變體誘導(dǎo).pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/fc336c57-d3d4-4df7-a943-494921f2c0c6/fc336c57-d3d4-4df7-a943-494921f2c0c61.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以火龍果(Hylocereusndatus)莖段組織為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)研究,建立火龍果莖段組織再生體系,并利用此再生體系進(jìn)行火龍果體細(xì)胞抗寒突變體的誘導(dǎo)與篩選,得到具有抗寒能力的火龍果植株。本實(shí)驗(yàn)著重研究了火龍果莖段外植體表面滅菌方法和不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)火龍果莖段愈傷組織的誘導(dǎo)和增殖、不定芽的分化以及生根的影響,同時(shí)利用火龍果莖段誘導(dǎo)出的愈傷組織在低溫下處理,將存活的愈傷組織增殖、分化和生根移栽,獲得具有抗寒特性的火龍果植株。主
2、要研究結(jié)果如下:
1.火龍果莖段外植體的最佳表面滅菌方法
選取火龍果一年生幼嫩無病蟲害枝條,切成2~4cm長(zhǎng)放置于大燒杯中,在自來水流下沖洗2h。將沖洗好的火龍果莖段放在超凈工作臺(tái)上,先用75%的酒精浸泡并搖晃30s,無菌水沖洗4~6次,再用0.1%升汞溶液浸泡8min,最后用無菌水沖洗4~6次。此種方法滅菌效果最好,污染率低至9.2%。
2.火龍果莖段愈傷組織誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基
火龍果莖段愈傷組織
3、誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為:MS+6-BA2.0mg·L-1+TDZ0.8mg·L-1+NAA0.1mg·L-1。此時(shí)莖段愈傷組織出愈率達(dá)92.7%,愈傷組織塊大,呈黃綠色致密細(xì)顆粒狀。
3.火龍果莖段不定芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基
火龍果莖段不定芽誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為:MS+TDZ0.4mg·L-1+KT0.5mg·L-1+IBA0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1。在此條件下不定芽再生率達(dá)到87.2%,且芽呈綠色,莖段粗壯
4、,長(zhǎng)勢(shì)健壯。
4.火龍果莖段最適生根培養(yǎng)基
火龍果莖段最適生根培養(yǎng)基為:1/2MS+NAA0.4mg·L-1+IBA0.3mg·L-1+AC500mg·L-1,生根率達(dá)到97.3%,而且平均每株生根數(shù)為7.1條,平均根長(zhǎng)達(dá)10.2cm,生根苗長(zhǎng)勢(shì)健壯。
5.煉苗移栽
當(dāng)生根苗莖段高5~7cm,根3~5條時(shí),將生根苗移栽至珍珠巖∶腐葉土∶蛭石=1∶2∶1混合基質(zhì)中,放在自然環(huán)境中生長(zhǎng)(冬天放置于溫室
5、大棚中生長(zhǎng)),適當(dāng)施肥,加強(qiáng)光照和水分管理,移栽成活率達(dá)97%。
6.火龍果體細(xì)胞抗寒突變體及火龍果抗寒植株的獲得
將繼代增殖15d的火龍果莖段愈傷組織分別在0、2、4℃的恒溫氣候箱中低溫處理48h,最終0℃條件下存活3塊愈傷組織,2℃條件下存活5塊愈傷組織,4℃條件下存活10塊愈傷組織。將這18塊愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)直至生根移栽,最后共得到55株火龍果植株。55株火龍果植株外部形態(tài)指標(biāo)與正常生長(zhǎng)的火龍果植株差異不明顯。
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