玉米耐低氮突變體的體細(xì)胞篩選.pdf_第1頁(yè)
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1、氮是玉米生長(zhǎng)發(fā)育的重要元素之一,近年來(lái)隨著產(chǎn)量的提高,我國(guó)土壤中的氮含量在迅速下降,極低的氮含量已不同程度地影響了玉米的生長(zhǎng)與產(chǎn)量。我國(guó)大部分土壤氮含量?jī)H有0.02%-0.2%,而氮肥的當(dāng)季利用率只有30%-40%,因此篩選和選育耐低氮玉米新種質(zhì)、新品系對(duì)瘠薄地區(qū)更具有實(shí)際意義。本試驗(yàn)以玉米幼胚作外植體誘導(dǎo)愈傷組織,通過(guò)體細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行玉米耐低氮突變體的篩選。 將幼胚誘導(dǎo)出的愈傷組織轉(zhuǎn)入低氮濃度的篩選培養(yǎng)基中連續(xù)篩選4次,篩選出的

2、耐性愈傷組織轉(zhuǎn)入正常培養(yǎng)基中恢復(fù)培養(yǎng)3次,最終得到耐低氮愈傷組織變異體,分化出的再生植株R0,經(jīng)溫室緩苗后移栽大田,自交授粉得R1代種子。 篩選分兩種方法進(jìn)行:等濃度篩選和梯度篩選。篩選過(guò)程中進(jìn)行愈傷組織生長(zhǎng)量測(cè)定同時(shí)觀察其類型變化,并對(duì)R1代種子千粒重、品質(zhì)和R1代幼苗硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性進(jìn)行測(cè)定。試驗(yàn)結(jié)果如下: (1)降低培養(yǎng)基中氮含量,愈傷組織的生長(zhǎng)減慢,濃度越低生長(zhǎng)越慢,隨著氮含量的降低,愈傷組織類型也

3、發(fā)生了較大的變化,Ⅱ型愈傷組織逐漸減少,Ⅲ型愈傷組織增多。根據(jù)N、T和X系列濃度對(duì)愈傷組織影響的比較,認(rèn)為在選擇耐低氮突變體時(shí),降低銨態(tài)氮或同時(shí)降低銨態(tài)氮和硝態(tài)氮進(jìn)行篩選的效果要好于降低硝態(tài)氮的篩選效果。 (2)由于等濃度篩選和梯度篩選Ⅱ型愈傷組織的比例比較接近,為了避免梯度篩選過(guò)程中存在適應(yīng)性變異,建議用等濃度篩選法進(jìn)行耐低氮突變體的篩選。 (3)通過(guò)對(duì)R1代種子品質(zhì)和R1代幼苗硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性的測(cè)定,初

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