1、本實驗室以前用cDNA微陣列方法發(fā)現(xiàn)某些分化相關(guān)基因如富含脯氨酸的小蛋白(small proline-rich proteins，SPRRs)、角蛋白(keratins)、cystatin A和involucrin等在食管癌中表達明顯下調(diào)，同時發(fā)現(xiàn)分化或DNA結(jié)合抑制物1(inhibitorofdifferentiation or DNAbinding 1，Id1)蛋白的表達上調(diào)。首先，我們借助組織芯片(免疫組織化學染色)方法驗證了Id

2、1和Id2在食管癌組織中的表達，結(jié)果表明Id1和Id2在食管癌的表達水平明顯高于正常食管上皮組織，部分組織中內(nèi)皮細胞高表達Id1和Id2。利用RNAi技術(shù)干擾Id1的表達，檢測了食管癌分化基因的表達，發(fā)現(xiàn)SPRR3蛋白表達明顯下調(diào)。 Id屬于HLH轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一，參與細胞分化及細胞凋亡。作為轉(zhuǎn)錄的負調(diào)節(jié)因子，Id與bHLH亞家族或非bHLH蛋白如pRB和Ets結(jié)合成二聚體并抑制其結(jié)合DNA序列。通過生物信息學的分析發(fā)現(xiàn)S

3、PRR3啟動子區(qū)存在多個Ets結(jié)合位點。我們構(gòu)建SPRR3啟動子區(qū)截短突變體，利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測了Id1及Ets1對SPRR3轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響，研究表明Id1過表達及沉默表達可以分別促進和抑制SPRR3基因的轉(zhuǎn)錄，Ets1過表達也可以促進SPRR3的轉(zhuǎn)錄活性。Transwell實驗表明Id1沉默表達可以促進食管癌細胞的侵襲能力。 本研究首次發(fā)現(xiàn)Id1對SPRR3表達的影響，初步探討了Id1對SPRR3轉(zhuǎn)錄調(diào)控的可能機制，但