1、背景: 肝癌是最常見的肝臟惡性腫瘤,占全世界腫瘤發(fā)生率的第五位,全球每年約有37萬多患者被新診斷為肝細(xì)胞癌.盡管肝癌的診斷和治療取得了一定的進(jìn)展,但預(yù)后依然較差.研究肝癌的發(fā)病機(jī)制和摸索新的診斷、治療方法一直是人類不斷努力的方向.目前,選擇性COX2抑制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用已成為腫瘤研究的熱點(diǎn)之一.尼美舒利(Nimesulide)是一種人工合成的COX-2特異性抑制劑,對(duì)結(jié)直腸癌和其它消化道腫瘤的防治取得了較好的實(shí)驗(yàn)和臨床效果.

2、 目的: 本研究擬通過MTT法、流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR、western blot等檢查,觀察Nimesulide在體外對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402增殖和凋亡的影響,并探討其可能的作用機(jī)制. 方法: 將不同濃度的尼美舒利(50～300gM)作用于Bel-7402肝癌細(xì)胞,采用MTT法檢測Nimesulide對(duì)細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡百分率的改變,逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測細(xì)胞內(nèi)COX

3、-2 mRNA、Bcl-2 mRNA及VEGFmRNA表達(dá)的改變,westem-blot法檢測細(xì)胞內(nèi)COX-2、Bcl-2及VEGF蛋白表達(dá)的變化. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS13.0軟件完成,計(jì)量資料數(shù)據(jù)表示方式以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD),兩組計(jì)量資料采用非獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),各組指標(biāo)間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析. 結(jié)果: MTT實(shí)驗(yàn)示:Nimesulide呈劑量依賴性抑制Bel-7402細(xì)胞增殖.

4、流式細(xì)胞術(shù)示:使用不同濃度Nimesulide作用于Bel-7402細(xì)胞48 h后,可誘導(dǎo)其凋亡,隨著藥物濃度增加,凋亡率顯著增加,差異有顯著性.同時(shí)伴有COX-2 mRNA、Bcl.2mRNA及VEGF mRNA表達(dá)的下調(diào),而且三者在蛋白水平的表達(dá)也顯著降低. 結(jié)論: 本實(shí)驗(yàn)以肝癌細(xì)胞系Bel-7402為對(duì)象,研究尼美舒利對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)作用.研究結(jié)果表明Nimesulide可以顯著抑制Bel-7402細(xì)