漢黃芩苷對人肝癌細胞BEL-7402的抑制作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一,臨床治療難度大、療效差。利用藥物對細胞凋亡相關(guān)基因的調(diào)控來誘導(dǎo)細胞凋亡成為目前腫瘤治療的研究熱點。黃芩中的黃酮在體外抗腫瘤作用方面表現(xiàn)出活性,但目前國內(nèi)外尚未有關(guān)于漢黃芩苷體外抗腫瘤作用的相關(guān)研究。本實驗研究漢黃芩苷對體外培養(yǎng)的人Bel-7402細胞的生長抑制及凋亡的影響,旨在探討漢黃芩苷抗腫瘤作用機制,為漢黃芩苷的藥物開發(fā)及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 通過使用不同濃度漢黃芩苷作用于體外培養(yǎng)的Bel-7

2、402細胞,利用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)改變,收集細胞后,使用A0/EB雙染色法對細胞進行染色,熒光顯微鏡下觀察細胞死亡情況。我們發(fā)現(xiàn)漢黃芩苷可以明顯抑制Bel-7402細胞生長,熒光顯微鏡下可見細胞凋亡。使用96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞,MTT試驗后檢測570nm吸光值,通過計算細胞生長抑制率進一步了解漢黃芩苷作用后細胞生長的抑制情況,得出4 μM濃度以上的漢黃芩苷對Bel-7402細胞均有抑制作用,48小時半數(shù)抑制濃度約為8μM。通過瓊脂糖凝

3、膠電泳分析漢黃芩苷作用后的細胞DNA,與對照組相比藥物處理組可見較明顯的DNA梯狀條帶,證實處理組細胞中有典型的細胞凋亡發(fā)生。 為研究漢黃芩苷抑制Bel-7402細胞并誘導(dǎo)其凋亡的機制,采用流式細胞儀分析凋亡情況及細胞周期的改變,發(fā)現(xiàn)細胞凋亡比率隨漢黃芩苷作用濃度的增加而增加,相同濃度下隨時間的延長G<,0>-G<,1>期細胞比率逐漸減小,S期、G<,2>期細胞比率明顯增大,說明漢黃芩苷對細胞增長的抑制作用主要在G<,2>/M期

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