1、背景:
　　隨著圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,早產(chǎn)兒存活率較前有了明顯的提高,但早產(chǎn)兒腦損傷發(fā)生率未見下降,研究發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)胞生成素對早產(chǎn)兒腦損傷具有一定的神經(jīng)保護(hù)作用。
　　目的:
　　1.早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷(White Matter Damage,WMD)動物模型的構(gòu)建;
　　2.探討重組人促紅細(xì)胞生成素(Recombinant Human Erythropoietin,rhEPO)對3日齡WMD大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用。
　

2、　方法:
　　新生3日齡(P3)SD大鼠120只隨機(jī)分為對照組,WMD組和rhEPO治療組,對照組僅分離左側(cè)頸總動脈,不結(jié)扎、不缺氧,rhEPO治療組大鼠結(jié)扎左側(cè)頸總動脈,術(shù)后6％氧氣+94%氮?dú)饣旌蠚庵腥毖?.5小時,WMD模型建立后立即按5000IU/kg腹腔注射一次rhEPO,WMD組大鼠造模方法同rhEPO治療組,模型建立后腹腔注射等量的生理鹽水,實(shí)驗(yàn)中測量三組大鼠不同時間點(diǎn)體質(zhì)量變化,并于術(shù)后24h、生后7d、生后21d

3、斷頭取腦,測量腦重量,石蠟包埋切片,行常規(guī)HE染色、MBP免疫組化,生后30d進(jìn)行懸吊試驗(yàn)、斜坡試驗(yàn)及曠場試驗(yàn)等神經(jīng)行為學(xué)檢測試驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1.WMD組和rhEPO組大鼠缺氧缺血后均出現(xiàn)行為異常改變,WMD組術(shù)后體質(zhì)量增長明顯落后于rhEPO組和對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[術(shù)后24h:(7.2±0.3)比(8.2±0.8)、(9.5±0.4),生后7d:(10.1±0.5)比(13.4±0.5)、(15.3±0.3)

4、,生后21d:(30.5±0.4)比(43.7±0.5)、(48.4±0.5),p均<0.05];
　　2.術(shù)后24小時對照組皮質(zhì)白質(zhì)分界清晰,細(xì)胞排列整齊,胼胝體細(xì)胞呈規(guī)則纖維狀排列,WMD組皮質(zhì)白質(zhì)分界消失,細(xì)胞排列紊亂,可見核固縮,皮質(zhì)下組織可見疏松改變,胼胝體細(xì)胞稀疏,rhEPO組核固縮及組織疏松情況較WMD明顯減輕;生后21天WMD組胼胝體變薄,側(cè)腦室明顯擴(kuò)大,rhEPO組側(cè)腦室輕度擴(kuò)大;
　　3.免疫組織化學(xué):三

5、組術(shù)后24h均未見MBP染色,生后7d對照組,rhEPO組胼胝體、皮質(zhì)下白質(zhì)可見一定程度的MBP染色,WMD組未見明顯MBP染色,生后21d對照組,rhEPO組胼胝體、皮質(zhì)下白質(zhì)可見大量MBP染色,WMD組MBP染色明顯減少;
　　4.神經(jīng)行為學(xué):WMD組大鼠玻璃棒懸吊時間明顯短于rhEPO組和對照組;斜坡試驗(yàn)中WMD組大鼠轉(zhuǎn)頭時間明顯長于rhEPO組和對照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[懸吊試驗(yàn)(min):(1.8±0.4)比(3.8

6、±0.4)、(4.0±0.2),斜坡試驗(yàn)(s):(9.3±0.8)比(4.4±0.7)、(3.8±0.5),p均<0.05];曠場及拒俘反應(yīng)試驗(yàn)中WMD組大鼠的評分均明顯低于rhEPO組和對照組,主要表現(xiàn)為行為遲緩,穿越方格數(shù)少及容易被抓取,很少回避及逃脫[曠場試驗(yàn)(分):(4.8±0.9)比(11.4±2.2)、(11.9±1.8),拒俘反應(yīng)試驗(yàn)(分):(1.0±0.6)比(3.1±1.0)、(3.4±1.1),p均<0.05]。