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![高密度脂蛋白促進(jìn)脂肪干細(xì)胞增殖機制的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/6eef4036-5820-466a-a1cc-c0aed133595a/6eef4036-5820-466a-a1cc-c0aed133595a1.gif)
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文檔簡介
1、背景和目的:脂肪干細(xì)胞作為最近發(fā)現(xiàn)的一類分布廣泛,獲取容易,分化能力較強的間充質(zhì)干細(xì)胞,正在引起越來越多的關(guān)注;相較于骨髓來源的干細(xì)胞,脂肪干細(xì)胞具有更明顯的優(yōu)勢,因此,對于脂肪干細(xì)胞,科研工作者們寄予了很大的期望;同時,令人關(guān)注的是,脂肪干細(xì)胞進(jìn)入機體后發(fā)生的變化,是否具有體外實驗?zāi)菢恿钊伺d奮的效果。
高密度脂蛋白作為人體內(nèi)維持膽固醇平衡,脂類代謝的一種重要脂蛋白,還具有抗氧化,抗動脈粥樣硬化等功能,在保護(hù)血管功能,維持機體
2、穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮不可缺少的作用。有報道證實,高密度脂蛋白對于血管內(nèi)皮細(xì)胞,血管平滑肌細(xì)胞等具有促增殖,抗凋亡的保護(hù)作用。
本研究聚焦于上述兩點,重點探討了高密度脂蛋白對于脂肪干細(xì)胞的影響,針對高密度脂蛋白促進(jìn)脂肪干細(xì)胞增殖這一現(xiàn)象,進(jìn)行了分子機制上的探究。通過一系列的實驗以調(diào)查,高密度脂蛋白是否對于脂肪干細(xì)胞存在促進(jìn)增殖的作用。
方法:從健康志愿者血液中分離出血漿,利用密度梯度離心的方法,分離出高密度脂蛋白;分離出小鼠脂肪
3、干細(xì)胞并傳代培養(yǎng)鑒定,人源脂肪干細(xì)胞從美國模式培養(yǎng)物集存庫(ATCC)購買;通過細(xì)胞水平實驗,利用不同濃度的高密度脂蛋白和不同時間點處理兩種脂肪干細(xì)胞,以MTT和BrdU鑒定細(xì)胞增殖效果;通過Western blotting實驗,驗證相關(guān)信號通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)分子和若干細(xì)胞周期關(guān)鍵蛋白質(zhì)分子的表達(dá)量變化,說明高密度脂蛋白促進(jìn)脂肪干細(xì)胞增殖作用的分子機制。
結(jié)果:通過密度梯度離心法成功分離出高密度脂蛋白;MTT實驗和BrdU實驗均證
4、實高密度脂蛋白可以促進(jìn)脂肪干細(xì)胞的增殖;Western blotting實驗表明,信號通路關(guān)鍵蛋白p-Akt和p-ERK1/2的水平明顯上調(diào),細(xì)胞周期蛋白D1和細(xì)胞周期蛋白E表達(dá)量上升,而細(xì)胞周期阻抑蛋白p21和p27表達(dá)量下調(diào)。
結(jié)論:高密度脂蛋白可以促進(jìn)脂肪干細(xì)胞的增殖;通過脂肪干細(xì)胞膜表面S1P1受體,促進(jìn)細(xì)胞周期蛋白D1和細(xì)胞周期蛋白E的表達(dá)量上升,并且下調(diào)細(xì)胞周期阻抑蛋白p21和p27的表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞周期進(jìn)程,進(jìn)而實
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