1、[目的]
　　 通過觀察辛伐他汀(Simvastatin,Sta)對膿毒癥大鼠肺組織不同時間點的核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)蛋白、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表達的影響,以及使用磷脂酰肌醇-3磷酸/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的特異性拮抗劑Ly294002初步探討是否通過磷脂酰肌醇-3磷酸/蛋白激酶B信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,探討辛伐他汀對膿毒癥大鼠肺保護作用的可能機制,為臨床應(yīng)用提供理論支持。
　　 [方

2、法]
　　 通過鼠尾靜脈注射內(nèi)毒素(LPS)復(fù)制膿毒癥大鼠模型。120只SD大鼠(雄性,SPF級,體重220～250克)隨機分為空白對照(Control)組(生理鹽水2ml iv.)、內(nèi)毒素(LPS)組(LPS5mg/kg,用生理鹽水稀釋至2ml iv.)、LPS+Sta組(LPS5mg/kg,Sta20mg/kg,生理鹽水稀釋至2ml iv.)、LPS+Sta+Ly組(LPS5mg/kg,Sta20mg/kg,Ly1.4mg/

3、kg,生理鹽水稀釋至2ml iv.);每組30只。分別在用藥后2h,4h,6h,12h,24h時間點隨機快速處死6只大鼠,按標準步驟取右肺中葉組織100mg送檢,用免疫組織化學(xué)法檢測肺組織NF-kB表達;取右肺下葉100mg用RT-PCR法檢測肺組織iNOSmRNA表達。
　　 [結(jié)果]
　　 1.各組大鼠肺組織H-E染色所見Control組各時點肺泡、肺間質(zhì)結(jié)構(gòu)正常;LPS組2h開始出現(xiàn)炎癥損傷,以6h最為顯著:肺泡腔

4、變窄,肺泡腔內(nèi)可見中性粒細胞明顯增多,偶見單核/巨噬細胞(MΦ)肺泡壁增厚,肺間質(zhì)充血水腫;LPS+Sta組中性粒細胞細胞浸潤較LPS組減輕,肺泡、肺間質(zhì)呈灶狀損害,組織間隙水腫輕;LPS+Sta+Ly組病理變化接近LPS組。
　　 2.各組大鼠肺組織不同時問點NF-kB蛋白表達
　　 Control組各時間點呈陰性表達;LPS組2h起呈陽性表達,至6h達高峰,12h開始下降,到24h表達仍然高于2h水平;LPS+Sta

5、組的表達及趨勢與LPS組類似,但各時間點表達較LPS組明顯減弱,各時間點積分光密度(IOD)值與LPS組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);LPS+Sta+Ly組各時點的表達量及趨勢與LPS組比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　 3.各組大鼠肺組織不同時間點iNOS mRNA的表達
　　 Control組各時間點iNOS mRNA微量表達;LPS組各時間點iNOS mRNA較對照組明顯增高(p＜0.05),i

6、NOS的表達從2h起升高,6h達高峰,12h開始下降,到24h表達仍然高于2h水平,有明顯的時效性;LPS+Sta組各時點表達于2h升高,趨勢同LPS組,但各時間點升高幅度明顯減少,iNOS的表達接近對照組的水平(p＞0.05),各時點灰度比值與LPS組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05);LPS+Sta+Ly組的表達量及趨勢與LPS組類似(p＞0.05),且各時點表達量高于LPS+Sta組及對照組的水平(p＜0.05)。
　　

7、 4.NF-kB蛋白表達水平與iNOS mRNA表達水平的相關(guān)分析
　　 經(jīng)直線相關(guān)分析顯示,膿毒癥大鼠肺組織NF-kB蛋白表達水平與iNOS mRNA表達水平呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為r=0.72(p＜0.01)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.膿毒癥時肺臟表現(xiàn)出以肺泡及肺間質(zhì)受累為主的損傷,肺組織NF-kB蛋白及iNOSmRNA過量表達可能是引起肺損傷的原因之一;
　　 2.辛伐他汀能改善膿毒癥時肺組織的病