1、電壓依賴性鈣通道在神經(jīng)發(fā)育過程中具有重要的作用，并負責將神經(jīng)細胞上傳導的電活動轉(zhuǎn)變?yōu)榧毎麅?nèi)的生化信號。以往研究表明，電壓依賴性鈣通道的功能活動及鈣離子的內(nèi)流共同參與了非成熟神經(jīng)元的多個發(fā)育過程，包括生長錐的生長和導向、神經(jīng)元的遷移和分化、軸突和樹突的生長，突觸可塑性的形成等。并參與調(diào)控多種發(fā)育相關(guān)基因的表達。 本研究首先運用免疫組織化學方法觀察了海馬不同亞區(qū)神經(jīng)元L型電壓依賴性鈣通道的兩種α1亞單位在發(fā)育過程中表達水平的變化，結(jié)

2、果顯示：大鼠出生后一天，CaV1.2α1C和CaV1.3α1D廣泛分布于海馬CA1、CA3和DG區(qū)的錐體細胞或顆粒細胞胞體區(qū)和近端樹突，二者在海馬各區(qū)的分布沒有顯著差異。但是，從出生后七天開始，二者在海馬各區(qū)的分布呈現(xiàn)差異性變化：在CA1區(qū)和DG區(qū)，CaV1.2α1C主要在錐體細胞或顆粒細胞近端樹突表達，而在胞體部分表達很少，CaV1.3α1D則主要集中分布在錐體細胞或顆粒細胞的胞體區(qū)，突起部分很少有表達；而在CA3區(qū)，CaV1.2α1

3、C和CaV1.3α1D均主要在錐體細胞的胞體部分表達，突起部分表達相對較少；此外，CaV1.2α1C和CaV1.3α1D在細胞局部的分布特征上亦明顯不同，前者主要呈現(xiàn)簇狀分布，而后者則呈均勻的分布；從出生后十四天一直到成年，CaV1.2α1C和CaV1.3α1D的表達分布趨于穩(wěn)定，CaV1.2α1C主要分布在CA1區(qū)和DG區(qū)的錐體細胞或顆粒細胞樹突部分，CA3區(qū)的錐體細胞胞體區(qū)和遠端樹突部分以及海馬的分子陷窩層、輻射層和多形層；CaV1

4、.3α1D則主要集中分布在CA1區(qū)、CA3區(qū)和DG區(qū)的錐體細胞或顆粒細胞的胞體區(qū)，其他區(qū)域很少分布。 實驗中設(shè)不加一抗和將一抗用特定抗原中和兩個對照組，均未發(fā)現(xiàn)有陽性染色，表明本實驗所用的一抗具有較好的抗原抗體特異性。 從灰度值檢測結(jié)果看：CaV1.2α1C在CA1錐體細胞胞體區(qū)的表達從出生后一天至七天呈逐漸增高，七天后一直到成年，表達相對穩(wěn)定；而在CA3錐體細胞胞體區(qū)，CaV1.2α1C的表達在七天和成年組各有一個明顯

5、的升高；在DG顆粒細胞胞體區(qū)，CaV1.2α1C從出生一直到出生后二十八天都低水平表達，僅在成年組有個較明顯的上升。CaV1.3α1D在CA1錐體細胞和DG顆粒細胞胞體區(qū)的表達在出生后七天和十四天各有一個上升；而在CA3錐體細胞胞體區(qū)，CaV1.3α1D的表達在各組均有明顯的上升。 進一步用膜片鉗技術(shù)，在海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)急性分離神經(jīng)元和腦片上觀察了L型電壓依賴性鈣通道全細胞電流在發(fā)育過程中的變化。 由此可見，在急性

6、分離海馬神經(jīng)元和海馬腦片上，L型電壓依賴性鈣通道電流隨著神經(jīng)元發(fā)育成熟，最大平均電流密度逐漸增加，電流—電壓曲線亦出現(xiàn)明顯的左移。 本研究應(yīng)用免疫組化研究發(fā)現(xiàn)，L型電壓依賴性鈣通道CaV1.2α1C和CaV1.3α1D亞單位在海馬不同亞區(qū)神經(jīng)元發(fā)育中呈現(xiàn)差異性表達，進一步結(jié)合膜片鉗技術(shù)從功能角度證實了形態(tài)學的結(jié)果，提示CaV1.2α1C和CaV1.3α1D亞單位在海馬發(fā)育過程中可能扮演著不同的角色。并且，這有助于人們對L型電壓依