1、目的:異丙酚是一種靜脈全身麻醉藥,因其起效快、作用時間短、蘇醒質(zhì)量好、對循環(huán)系統(tǒng)影響小而在臨床廣泛使用.C-fos與c-jun是一對關(guān)系密切的原癌基因,在中樞神經(jīng)系統(tǒng),可由于各種刺激而迅速發(fā)生一過性表達(dá),翻譯為FOS/JUN核蛋白,返回核內(nèi)對其他靶基因轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié).應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測FOS/JUN核蛋白,或用原位分子雜交方法檢測它們的mRNA,現(xiàn)已成為認(rèn)識腦結(jié)構(gòu)/功能的一個重要途徑,已經(jīng)應(yīng)用于全麻研究中.NO是一種可逆性彌散的神經(jīng)

2、介質(zhì)或信使物質(zhì), NOS是合成NO的關(guān)鍵酶,研究NOS陽性神經(jīng)元在腦內(nèi)的分布,可為認(rèn)識大腦功能變化提供形態(tài)學(xué)依據(jù).該實驗使用異丙酚麻醉大鼠后,檢測c-fos、c-jun基因在中樞神經(jīng)核團(tuán)的表達(dá)情況,同時檢測NOS在中樞神經(jīng)核團(tuán)的分布,從而了解異丙酚的可能中樞作用位點,為全身麻醉的中樞作用位點研究奠定一定的基礎(chǔ).材料和方法:健康Wistar大鼠,體重約150g,雌雄不拘,隨機(jī)數(shù)字表法分為六組:空白對照組(C組)、小劑量異丙酚組(50mg/

3、kg,P1組)、中等劑量異丙酚組(100mg/kg,P2組)、大劑量異丙酚組(150mg/kg,P3組)、斷尾刺激組(S1組)、異丙酚作用后斷尾刺激組(S2組).經(jīng)灌注后取各組動物全腦固定,冠狀冰凍切片, 免疫組織化學(xué)法(ABC法)檢測FOS及JUN蛋白,地高辛標(biāo)記的mRNA探針原位雜交法檢測c-fos mRNA及c-jun mRNA,NADPH-d酶組織化學(xué)法檢測NOS.統(tǒng)計各組大鼠腦片的陽性神經(jīng)元在神經(jīng)核團(tuán)的分布.結(jié)果和結(jié)論:實驗發(fā)

4、現(xiàn):① C組:FOS及JUN蛋白、c-fos mRNA及c-jun mRNA均有少量弱陽性細(xì)胞表達(dá),散在分布在Pir、SO、LS及LHb等神經(jīng)核團(tuán),NOS在大腦內(nèi)廣泛分布.② P<,1>、P<,2>、P<,3>組:FOS及JUN蛋白、c-fos mRNA及c-jun mRNA表達(dá)較對照組明顯增多,主要分布在Pir、ACB、LS、Pe、VLG、Den、SO、SCh、AVPO、Sol、BL、PV、LHb、Icj及SuM等核團(tuán),表達(dá)的陽性神經(jīng)

5、元數(shù)量與異丙酚劑量正相關(guān).NOS表達(dá)較對照組明顯減少,其陽性神經(jīng)元數(shù)量與異丙酚劑量呈負(fù)相關(guān).③ S<,1>、S<,2>組:FOS及JUN蛋白、c-fos mRNA及c-jun mRNA表達(dá)較對照組明顯增多,BL、PV、LHb及Icj等核團(tuán)FOS及JUN蛋白、c-fos mRNA及c-jun mRNA、NOS表達(dá)較P<,1>、P<,2>、P<,3>組增多.④FOS及JUN蛋白、c-fos mRNA及c-jun mRNA陽性神經(jīng)元在同組大鼠

6、的中樞分布的數(shù)量不同,但分布的神經(jīng)核團(tuán)部位基本一致.該研究據(jù)此得出以下結(jié)論:1. 異丙酚麻醉引起大鼠中樞Pir、ACB、LS、Pe、VLG、Den、SO、SCh、AVPO、Sol、BL、PV、LHb、Icj及SuM等核團(tuán)內(nèi)c-fos、c-jun基因表達(dá)明顯增多,異丙酚同時抑制大鼠中樞Pir、ACB、LS、Pe、VLG、Den、SO、SCh、AVPO、Sol、BL、PV、LHb、Icj及SuM等核團(tuán)NOS.2. 正常情況下大鼠中樞Pir、

7、SO、LS及LHb等核團(tuán)內(nèi)c-fos、c-jun基因有少量表達(dá), NOS分布廣泛;斷尾刺激引起大鼠中樞BL、PV、LHb及Icj等核團(tuán)內(nèi)c-fos、c-jun基因表達(dá)和NOS明顯增多.3. 大鼠中樞Pir、ACB、LS、Pe、VLG、Den、SO、SCh、AVPO、Sol、BL、PV、LHb、Icj及SuM等核團(tuán)可能為異丙酚麻醉的作用位點,其中ACB、Pe、VLG、Den、SCh、AVPO、Sol、及SuM等核團(tuán)為異丙酚麻醉作用位點的可