1、背景目的：A型肉毒毒素(BTA)目前廣泛用于肌張力過(guò)強(qiáng)性疾病，包括賁門失弛緩、Oddi括約肌痙攣等消化道疾病，并取得了較好的效果。隨著器質(zhì)性胃腸病診斷和治療手段的提高，功能性胃腸病(FGID)日益受到重視。而動(dòng)力和感覺(jué)異常是FGID中研究的熱點(diǎn)。由于肉毒毒素能抑制神經(jīng)肌肉接頭乙酰膽堿的釋放，降低肌肉張力，本研究的目的是通過(guò)腹腔注射BTA，觀察大鼠腸道功能的變化及腸道乙酰膽堿酯酶(AChE)、β-內(nèi)啡肽(β-EP)和P物質(zhì)(SP)表達(dá)的變

2、化，為胃腸道肌張力過(guò)強(qiáng)相關(guān)性疾病探討可能的治療手段。 材料與方法：出生8周Wistar大鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每組12只。A組、B組、C組分別腹腔注射含BTA4、2、1U的生理鹽水2mL；D組為正常對(duì)照，腹腔注射生理鹽水2mL。記錄動(dòng)物的排便顆粒數(shù)并測(cè)量糞便含水量以評(píng)價(jià)其大腸功能，記錄動(dòng)物進(jìn)食量以評(píng)價(jià)胃攝食功能變化，監(jiān)測(cè)體重變化評(píng)價(jià)BTA對(duì)動(dòng)物體重的影響。四周后于各組隨機(jī)取6只(雌雄各半)應(yīng)用直腸內(nèi)球囊擴(kuò)張的方法評(píng)價(jià)

3、內(nèi)臟的敏感性。給予10％碳沫1mL/100g體重灌胃，20分鐘后解剖；測(cè)量碳沫在小腸推進(jìn)的百分比，評(píng)價(jià)小腸功能變化。取大鼠回腸、回盲部、大腸標(biāo)本，行蘇木素伊紅(HE)染色及AChE、SP、β-EP免疫組織化學(xué)染色評(píng)價(jià)對(duì)腸道結(jié)構(gòu)的影響及相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)的變化。采用甲苯胺藍(lán)改良染色(Toluidineblueimprovedstainingmethod)觀察各組肥大細(xì)胞(MC)數(shù)量的多少。各組留6只(雌雄各半)繼續(xù)觀察排便、攝食及體重的變化，飼

4、養(yǎng)至12周重復(fù)上述內(nèi)容。 結(jié)果：A組大鼠僅在給藥后一周內(nèi)相比D組出現(xiàn)一過(guò)性排便次數(shù)減少(P＜0.05)。給藥后4周，各給藥組與正常對(duì)照組相比直腸敏感性無(wú)明顯變化；A組(53.89±3.98％)及B組(53.21±2.96％)大鼠的小腸碳沫推進(jìn)比率減慢，與D組(66.41±5.56％)相比P＜0.05，C組(64.31±5.55％)與D組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別，A、B組小腸、回盲部、大腸的肥大細(xì)胞染色計(jì)數(shù)、AChE、SP的表達(dá)較D組均減少(

5、與D組相比P＜0.05)，但C組與D組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。A、B組小腸黏膜層以及B組大腸黏膜層β-EP含量較對(duì)照組升高，但A組大腸、回盲部以及B組回盲部與對(duì)照組無(wú)明顯差別。給藥后12周，各組動(dòng)物的小腸推進(jìn)速度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，A、B組小腸、回盲部以及A組的大腸肥大細(xì)胞計(jì)數(shù)較對(duì)照組仍減少。A、B組各部位AChE的表達(dá)仍明顯減少；A組各部位的SP表達(dá)較對(duì)照組仍明顯減少，B組動(dòng)物大腸黏膜層SP表達(dá)與對(duì)照組無(wú)差異，其他部位仍顯著減少。A、B組小腸黏膜層β

6、-EP含仍較對(duì)照組升高。各組動(dòng)物血漿β-EP含量在4周與12周均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。 結(jié)論：腹腔注射低劑量A型肉毒毒素能一過(guò)性減少大鼠的排便次數(shù)，但不影響大鼠的進(jìn)食量、體重的增長(zhǎng)以及糞便的含水量。給藥后4周能夠減慢小腸的推進(jìn)速度，但給藥后12周時(shí)這種作用消失；能減少腸道MC的數(shù)量，持續(xù)時(shí)間不短于12周。能夠減少腸道AChE、SP的表達(dá)，對(duì)小腸β-EP具有升高作用。因此，A肉毒毒素能通過(guò)減少腸道興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的表達(dá)，減慢腸推進(jìn)速度，推測(cè)