白魔芋組織培養(yǎng)和快繁技術(shù)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究以宜賓市特有的半野生白魔芋(AmorphophallusalbusP.Y.LiuetJ.F.Che)品種--“大青稈”為研究對(duì)象,以其葉片、葉柄、芽和塊莖為外植體,通過在不同時(shí)間段誘導(dǎo)尋找最佳接種材料;同時(shí)利用多因素和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)結(jié)果作方差分析和多重比較,系統(tǒng)的探索了適合愈傷組織誘導(dǎo)和不定芽增殖的技術(shù)參數(shù)組合,并建立了白魔芋芽的無菌苗快速繁殖體系,為該稀缺品種規(guī)模化生產(chǎn),獲得優(yōu)良性狀的植株,并保持其種的純度奠定基礎(chǔ)。

2、主要研究結(jié)果如下: 1、不同外植體在不同季節(jié)啟動(dòng)試驗(yàn)表明,5月份接種葉片和葉柄啟動(dòng)率相對(duì)較高,3月份芽誘導(dǎo)啟動(dòng)率最大達(dá)90%,而塊莖在7月份接種污染率較低。同時(shí)以塊莖為外植體不同方式滅菌試驗(yàn)表明:較好的消毒方法是經(jīng)30s酒精,8min0.1%HgCl2處理后無菌水洗兩次,再經(jīng)8min10%NaClO處理后無菌水洗6次,外植體的污染率最低為15%,褐化率為10%。 2、初代培養(yǎng)中,較有利于塊莖誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基配方組合為

3、:MS+6-BA1mg.L-1+NAA0.2mg.L-1+TDZ0.1mg.L-1,啟動(dòng)率達(dá)84.3%。 3、繼代增殖培養(yǎng)中,影響不定芽分化的最大因素是IAA,其次是6-BA和NAA,選取各因素最優(yōu)水平,確定較佳誘導(dǎo)組合水平為MS+6-BA2mg·L-1+IAA2mg·L-1+NAA0.05mg·L-1,誘導(dǎo)率達(dá)到98.33%。 芽的分化試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)6-BA/NAA濃度比高有利于芽的生長(zhǎng),但是6-BA濃度過大對(duì)芽生長(zhǎng)有一定

4、抑制作用,因此選擇MS+BA2mg.L-1+NAA0.01mg·L-1作為芽分化較好的培養(yǎng)基,增殖系數(shù)可達(dá)2.86。 4、誘導(dǎo)組培苗生根的較適培養(yǎng)基:1/2MS+NAA0.2mg·L-1+20g·L-1蔗糖,生根能力強(qiáng),生根率達(dá)到92.8%,根長(zhǎng)且健壯。 5、探究芽的一步成苗試驗(yàn)。在一定激素配比并添加水解酪蛋白(CH)和活性炭的作用下,在MS+6-BA0.5mg·L-1+TDZ0.5mg·L-1+CH200mg·L-1+

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