1、[研究背景]舌下絡脈診是中醫(yī)舌診的重要組成部分，因其顯露易見、反應靈敏，為臨床觀察人體氣血、津液盈虧和瘀血輕重的重要指征。我們在長期的原發(fā)性肝癌和肝硬化臨床研究中發(fā)現(xiàn)，上述患者多伴有舌下絡脈的擴張、迂曲等形態(tài)及青紫、絳紫等顏色變化，這種變化非常靈敏，且多與患者的病情進展和治療預后明顯相關。
　　 祖國醫(yī)學認為，肝臟與舌有著密切的聯(lián)系，《靈樞·經(jīng)脈》中提到：“厥陰者肝脈也，……而脈絡于舌本也”，故肝臟的異?？稍谏嗌铣霈F(xiàn)相應的改變。

2、已有的相關研究提示，異常舌下絡脈形成可能與上述患者伴有的門靜脈壓力增高有關，如靳士英等通過動物實驗發(fā)現(xiàn)舌下絡脈異?？赡芘c門脈高壓時引起的舌靜脈壓力升高有關，還有人對118例門脈高壓患者采用術中測壓和觀察舌下絡脈病理變化相結合的方法研究發(fā)現(xiàn)，門脈高壓癥患者的舌下絡脈曲張率為100％。我們階段性的研究結果也顯示，原發(fā)性肝癌患者舌下絡脈異常與肝門脈血管及其局部血液動力學某些指標直接相關。但門脈高壓與異常舌下絡脈形成之間的關聯(lián)，尤其是門脈高壓過

3、程中引起舌下絡脈產(chǎn)生變化的分子機制目前尚不清楚。我們認為，舌下絡脈和肝門靜脈作為人體靜脈血管系統(tǒng)的組成部分，二者在病理上必然存在密切的內在聯(lián)系。并注意到肝癌和肝硬化過程中患者異常的舌下絡脈不僅表現(xiàn)為絡脈顏色、形狀等的異常，更會在絡脈周圍出現(xiàn)瘀點以及周圍瘀血細絡增多等特點，這很難簡單地用門靜脈壓力增高引起舌下絡脈被動擴張來完整解釋。這也提示我們，肝硬化門靜脈高壓癥異常舌下絡脈表現(xiàn)有其更深層次的物質基礎。
　　 隨著現(xiàn)代腫瘤學和分子

4、生物學研究的不斷深入，逐步揭示了血管形成的分子機制。在成體中生理性和病理性的血管生成機制是血管的主要形成方式。許多分子在血管生成中起著正向調節(jié)作用。在所有己知的血管生成調控因子中，血管內皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)是最主要的。缺氧反應、機械應力等多種機制參與了VEGF基因的誘導。低氧情況下，缺氧誘導因子-1(Hypoxia-inducible factor1，HIF-1)通

5、過刺激VEGF的轉錄和增強VEGFmRNA的穩(wěn)定性從而增加VEGF蛋白的表達。VEGF通過內皮型一氧化氮合酶刺激一氧化氮的合成，介導血管的擴張及增加其滲透性。近年來的研究也己證實，門靜脈高壓癥過程中肺臟和脾臟中也存在血管生成現(xiàn)象。我們注意到異常舌下絡脈在形態(tài)上的多樣性、紊亂無序與不同亞型VEGF誘導的血管生成的表現(xiàn)有相似之處。因此設想根據(jù)“血管生成”理論，重點從血管生成的角度，探討肝硬化門脈高壓模型異常舌下絡脈形成可能的分子機制。

6、>　　 [目的]
　　 本研究擬通過制備肝硬化門脈高壓犬模型，觀察其舌下絡脈的變化，并從血管生成的角度，探尋VEGF與異常舌下絡脈間的關系。為揭示異常舌下絡脈形成的分子機制提供數(shù)據(jù)支持。
　　 [方法]
　　 將Beagle犬隨機分為正常組和模型組。以二甲基亞硝胺(dimethylnitrosamine，DMN)誘導制備肝硬化門脈高壓犬模型，觀察舌下絡脈形態(tài)、顏色；生物電記錄系統(tǒng)測定其門脈壓力；硝酸還原酶法測定

7、犬血清中NO濃度；ELISA法檢測血清中VEGF、HIF-1α表達量；免疫組織化學方法檢測犬舌組織血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及低氧誘導因子(hypoxiainducible factor1α，HIF-1α)的表達；Real-Time PCR檢測VEGFmRNA、HIF-1αmRNA的表達水平。
　　 [結果]
　　 模型組Beagle犬舌下血管形態(tài)學

8、和顏色較正常組出現(xiàn)了明顯改變，表現(xiàn)為下絡脈出現(xiàn)迂曲增粗，細絡增多顏色暗紅，甚至紫暗；模型犬血清NO濃度顯著升高，VEGF、HIF-1α蛋白表達顯著增高；正常對照組犬舌下血管VEGF、HIF-1α幾乎無表達，模型組犬可見VEGF、HIF-1α蛋白表達顯著增高，VEGFmRNA、HIF-1αmRNA也隨之顯著增高。
　　 [結論]
　　 門靜脈壓力增高為肝硬化模型犬異常舌下絡脈形成的重要直接因素，VEGF誘導的血管生成參與了