1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文Survivin反義肽核酸對肺腺癌A549細胞影響的實驗研究姓名：李學(xué)昌申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（胸心外）指導(dǎo)教師：閔家新20061101第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文序列(232—251bp)作為作用靶位，以人工合成并標記熒光蛋白的反義肽序列(aPNA)抑制此靶區(qū)，用脂質(zhì)體共轉(zhuǎn)染法將其轉(zhuǎn)染肺腺癌A549細胞株，在倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染結(jié)果并進行鑒定，觀察細胞生長情況，檢測不同時間和濃度下細胞增值特性，用MTT

2、法檢測細胞存活率，流式細胞分析術(shù)檢測各細胞周期的比例，并用MTT法檢測不同時段脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染aPNA組細胞與正常組細胞在加入一定濃度的順鉑下的生長情況；在此基礎(chǔ)上，進一步采用RTPCR、W色stemB10t、免疫組化等方法探討脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染SurvivinaPNA后肺腺癌A549細胞周期基因p21及Survivin基因的mRNA和蛋白的變化。一綜上所述，本研究得出以下結(jié)論：1NSCLC癌組織中Survivin呈高表達，與NSCLC患者的性別、病

3、理類型無關(guān)，與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及TNM分期相關(guān)；NSCLC中Survivin、p16蛋白表達呈正相關(guān)，二者在肺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。2SurvivinaPNA能成功轉(zhuǎn)染肺腺癌A549細胞，轉(zhuǎn)染后可有效的抑制肺癌細胞內(nèi)SurvivinmRNA和蛋白的表達，并可抑制P2l基因的表達，阻止腫瘤細胞經(jīng)過G。期進入M期，抑制肺癌細胞的生長，引發(fā)細胞凋亡。其抑制作用有時間依賴性和濃度依賴性。3SurvivinaPNA與順鉑聯(lián)合作用