1、目的:
　　探討非選擇性β-受體阻滯劑-鹽酸普萘洛爾(propranolol)對(duì)人肺腺癌細(xì)胞(lungadenocarcinoma cells，LAC)血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表達(dá)情況的影響作用，揭示非選擇性β-受體阻滯劑抑制肺腺癌血管生成的機(jī)理，旨在為普萘洛爾在抗腫瘤血管治療方面提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　把呈對(duì)數(shù)期生長且生長狀態(tài)良好

2、的肺腺癌A549細(xì)胞挑選出來，將其接種在6孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行培養(yǎng)，定時(shí)更換細(xì)胞培養(yǎng)液，采用隨機(jī)分組的原則將其分為實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，待觀察到細(xì)胞貼壁達(dá)到80％以上時(shí)，吸凈6孔板中的培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組的每孔中分別加入2ml不同濃度(1、2、4、8、16 ug/ml)的普萘洛爾，空白對(duì)照組的孔中加入同等體積的培養(yǎng)液(普萘洛爾濃度為0 ug/ml)，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。孵育24小時(shí)后，采用免疫組織化學(xué)的方法對(duì)肺腺

3、癌A549細(xì)胞VEGF的表達(dá)進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)用藥前后實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組中肺腺癌A549細(xì)胞VEGF蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　(1)實(shí)驗(yàn)組和空白對(duì)照組中，肺腺癌A549細(xì)胞均存在VEGF的表達(dá)，其蛋白陽性信號(hào)主要見于細(xì)胞核的核膜周圍和胞質(zhì)內(nèi)。
　　(2)與空白對(duì)照組相比，經(jīng)過普萘洛爾處理后，實(shí)驗(yàn)組中肺腺癌A549細(xì)胞VEGF的蛋白表達(dá)均減弱，其蛋白陽性信號(hào)降低，但其表達(dá)位置未見改變。
　　結(jié)論:
　　(

4、1)肺腺癌A549細(xì)胞接種后3～5天呈對(duì)數(shù)生長，之后進(jìn)入生長平臺(tái)期，最后，細(xì)胞的生長速度減慢。給予藥物處理后，細(xì)胞的生長速度明顯降低，大量細(xì)胞進(jìn)入凋亡狀態(tài)。
　　(2)肺腺癌A549細(xì)胞的血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上普遍存在VEGF受體。VEGF可以在組織內(nèi)激活ERK/MAPK通路，從而促進(jìn)血管的生成。
　　(3)普萘洛爾對(duì)VEGF蛋白表達(dá)陽性的細(xì)胞和強(qiáng)陽性的細(xì)胞均有殺傷作用，可以抑制肺腺癌A549細(xì)胞VEGF蛋白的表達(dá)。
　　(