1、第二軍醫(yī)大學碩士學位論文葛根素注射液逆轉(zhuǎn)胃癌多藥耐藥的實驗研究姓名：王利申請學位級別：碩士專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床指導教師：魏品康20040501第二軍醫(yī)大學碩十學位論文中文摘要目的術(shù)研究的目的是為尋找適合臨床應用的新型多藥耐藥(MDR)逆轉(zhuǎn)劑，通過體外實驗觀察葛根素注射液對人胃癌耐藥細胞系SGC7901／VCR的多藥耐藥性的影響，然后建立人胃癌裸鼠原位移植多藥耐藥模型，通過體內(nèi)實驗觀察葛根素逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性的作用，并初步探討其作用機理。

2、方法通過MTT藥敏實驗，觀察葛根素注射液的細胞毒性及其是否能夠逆轉(zhuǎn)SGC7901／VCR對5一Fu、VCR、DDP、ADM的多藥耐藥性。應用流式細胞儀檢測使用葛根素前后細胞周期變化、胞漿內(nèi)藥物濃度，熒光顯微鏡顯示細胞內(nèi)化療藥物的熒光強度。采用免疫細胞化學染色法檢測耐藥細胞中MRP和P—gp蛋白的表達情況。在體內(nèi)實驗的基礎(chǔ)上，采用“膠粘法”建立人胃癌裸鼠原位移植多藥耐藥模型，將裸鼠隨機分為生理鹽水組、5一Fu組、5Fu葛根素組、5Fu異博

3、定組、葛根素組，每組10只，通過觀察裸鼠生長狀態(tài)、瘤體生長特性及腫瘤病理形態(tài)，計算原位移植瘤平均體積及抑瘤率，檢測原位移植瘤中PgP及MRP蛋白的表達。結(jié)果葛根素注射液能夠逆轉(zhuǎn)SGC7901／VCR對5Fu、ADM、VCR、DDP的耐藥性，逆轉(zhuǎn)指數(shù)分別為351、123、2135、1270。與未使用葛根素的SGC7901／VCR比較，細胞s期和G2M期增加，Gl期減少，細胞內(nèi)的阿霉素熒光強度明顯增強，pgP和MRP的表達明顯減弱。同時成功

4、建立了人胃癌裸鼠原位移植多藥耐藥模型，移植瘤組織形態(tài)及生物學方面符合人胃癌特征，回復細胞培養(yǎng)后，應用MTT檢測該細胞對5一Fu、ADM、VCR、DDP仍具有交叉耐藥性，與移植前相比無顯著差別。SGC7901組和SGC7901／VCR組細胞膜和胞漿內(nèi)均有pgP表達，SGC790I／VCR組為強陽性染色十十十，SGC7901組為十一十十。通過病理學組織觀察，各組均有臨近淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；熃M臟器轉(zhuǎn)移率均較生理鹽水組明顯降低，有顯著性差異(P00