木蹄層孔菌多糖免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的: 探討木蹄層孔菌多糖(Fomes fomentarius polysaccharides,F(xiàn)FP,木蹄多糖)的免疫調(diào)節(jié)作用及其可能的作用機(jī)制。 方法: MTT法檢測(cè)正常小鼠免疫細(xì)胞的代謝活力,光鏡下觀察藥物作用后小鼠腹腔滲出細(xì)胞形態(tài)及密度的變化,ELISA法檢測(cè)腫瘤壞死因子α(TNF-α)、干擾素γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素2(IL-2)的含量,雞紅細(xì)胞吞噬法檢測(cè)巨噬細(xì)胞的吞噬功能,綿羊紅細(xì)胞免疫法檢測(cè)正常

2、小鼠體液免疫功能。采用皮下注射環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CP)復(fù)制免疫功能低下的動(dòng)物模型,稱量胸腺、脾臟重量計(jì)算臟器指數(shù),碳廓清法測(cè)定單核巨噬細(xì)胞吞噬功能,綿羊紅細(xì)胞免疫法檢測(cè)免疫抑制小鼠體液免疫功能,同時(shí)采用二硝基氟苯(dinitro-fluorobenzene,DNFB)誘導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(delayed-type hypersensitivity,DTH)模型,觀察免疫抑制小鼠細(xì)胞免疫功能,顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)小鼠外

3、周血白細(xì)胞總數(shù)。 結(jié)果: 發(fā)現(xiàn)FFP(100,50,25μg/ml)可以明顯促進(jìn)正常小鼠脾細(xì)胞代謝活力(P=0.000,P=0.001,P=0.004),促進(jìn)正常小鼠脾細(xì)胞分泌細(xì)胞因子TNF-α(P=0.000,P=0.000,P=0.001)、IFN-γ(P=0.000,P=0.000,P=0.001)、IL-2(P=0.002,P=0.002,P=0.023),與對(duì)照組相比,F(xiàn)FP促進(jìn)脾細(xì)胞分泌TNF-α的作用最為明

4、顯;FFP顯著增強(qiáng)正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞代謝活力(P=0.000,P=0.000,P=0.004),促進(jìn)腹腔滲出細(xì)胞分泌TNF-α(P=0.000,P=0.000,P=0.000),且在一定的濃度范圍內(nèi)具有劑量依賴趨勢(shì)。光鏡下可見FFP給藥組腹腔滲出細(xì)胞細(xì)胞密度增加,形態(tài)發(fā)生明顯改變,細(xì)胞呈橢圓形、棒狀、梭形、多角形或不規(guī)則形,表面不規(guī)則或有偽足狀突起。FFP(100,50,25 mg/kg)顯著增強(qiáng)綿羊紅細(xì)胞(SRBC)所致正常小鼠特異

5、性抗體生成(P=0.005,P=0.017,P=0.044),F(xiàn)FP(100,50mg/kg)可以增強(qiáng)正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞(CRBC)的吞噬率和吞噬指數(shù)(P=0.000,P=0.002),(P=0.000,P=0.004)。FFP高、中劑量(200,100 mg/kg)均可顯著提高環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制小鼠胸腺和脾臟指數(shù)(P=0.003,P=0.044),(P=0.010,P=0.038)。FFP高劑量(200 mg/kg)可

6、以顯著提高環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制小鼠體內(nèi)碳粒廓清能力(P=0.015),提高免疫功能抑制小鼠的巨噬細(xì)胞吞噬功能。FFP高、中劑量(200,100 mg/kg)均可顯著提高綿羊紅細(xì)胞(SRBC)所致環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制小鼠血清溶血素水平(P=0.005,P=0.031)。FFP高、中劑量(200,100 mg/kg)均可顯著提高環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制小鼠DTH反應(yīng)耳廓腫脹度(P=0.003,P=0.029),F(xiàn)FP高劑量(200 mg/kg)

7、可以顯著提高環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫抑制小鼠DTH反應(yīng)耳廓腫脹率(P=0.017)。FFP高、中劑量(200,100 mg/kg)均可提高環(huán)磷酰胺處理組小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平(P=0.001,P=0.033)。 結(jié)論: 1.木蹄多糖(FFP)對(duì)正常小鼠具有免疫促進(jìn)作用,可以顯著增強(qiáng)正常小鼠免疫細(xì)胞代謝活力,促進(jìn)正常小鼠免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2和增強(qiáng)正常小鼠的體液免疫功能。 2.FFP體外可促

8、進(jìn)IL-2、IFN-γ分泌,整體水平促進(jìn)正常小鼠產(chǎn)生溶血素即IgM,提示其增強(qiáng)體液免疫功能機(jī)制可能與促進(jìn)IL-2、IFN-γ分泌有關(guān)。 3.FFP體外可以顯著增強(qiáng)正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞(主要為巨噬細(xì)胞)代謝活力,可促進(jìn)正常小鼠腹腔滲出細(xì)胞分泌細(xì)胞因子TNF-α,F(xiàn)FP體內(nèi)可以活化并增強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞的吞噬功能,提示巨噬細(xì)胞是FFP作用的靶細(xì)胞之一。 4.采用環(huán)磷酰胺成功建立免疫功能低下的小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?5.木蹄多糖對(duì)

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