1、目的：研究骨髓間質(zhì)干細胞體內(nèi)外免疫調(diào)節(jié)的作用及其機制。 方法：從胚胎及Wistar大鼠股骨中分離培養(yǎng)間質(zhì)干細胞，經(jīng)克隆化分選出形態(tài)均一的細胞，用流式細胞術檢測其表面標志以鑒定其純度。將分離培養(yǎng)的骨髓間質(zhì)干細胞接種于96孔板，待其長滿孔面積的80％～90％時用直線加速器以30GY劑量照射，然后與分離的外周血淋巴細胞共培養(yǎng)3d，以單獨培養(yǎng)的淋巴細胞為對照，加入ConA刺激68h，分別使用MTT法和3H-TdR法檢測MSCs對外周血淋

2、巴細胞增殖反應的影響。采用RT-PCR和Real-timePCR檢測經(jīng)MSCs處理的人外周血淋巴細胞TGF-β1、IL-6、IL-8、IL-10的基因表達，以未經(jīng)MSCs處理的同一人外周血淋巴細胞標本作對照。將SD大鼠的真皮移植到Wistar大鼠創(chuàng)口上，加壓包扎，同時將2×106的Wistar大鼠MSCs經(jīng)尾靜脈注射到Wistar大鼠體內(nèi)，以經(jīng)同樣手術處理而不注射MSCs的Wistar大鼠為對照。無菌分離Wistar大鼠外周血及脾臟淋巴

3、細胞，并用Wistar大鼠MSCs及ConA處理，以ConA單獨處理的Wistar大鼠淋巴細胞為對照。將2×106的MSCs在不同的時間點經(jīng)尾靜脈注射到Wistar大鼠體內(nèi)，在每次注射前經(jīng)尾靜脈采血測定外周血中CD4+、CD8+淋巴細胞占整個淋巴細胞數(shù)量的比值。 結果：MSCs對ConA刺激的淋巴細胞增殖的影響與MSCs和淋巴細胞的比值有關，當比值較大時MSCs對ConA刺激的淋巴細胞增殖有明顯的抑制作用，但是比值較小時反而會促

4、進其增殖。MSCs對淋巴細胞分泌TGF-β1無顯著性影響，MSCs對ConA刺激的淋巴細胞分泌IL-6也無顯著性影響，卻促進淋巴細胞分泌IL-10，減少淋巴細胞分泌IL-8。皮膚移植實驗顯示MSCs能延長異種移植皮膚的存活時間。經(jīng)MSCs作用的不同時間點Wistar大鼠外周血CD4+，CD8+淋巴細胞的數(shù)量比值沒有顯著性變化，而在體外實驗中，MSCs只對經(jīng)ConA刺激的Wistar脾臟CD4+淋巴細胞有影響。 結論：MSCs能下