1、前言: 肺癌是全球發(fā)病率最高，對人類健康和生命危害最嚴(yán)重的惡性腫瘤之一。近年來，全球肺癌發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，特別在女性中更為明顯。目前已經(jīng)公認(rèn)吸煙是肺癌的主要危險因素，而在我國女性吸煙率很低，女性肺癌的發(fā)病率卻呈逐年增高的趨勢。女性肺癌病例中以非吸煙者占多數(shù)，吸煙對女性肺癌人群歸因危險度僅為20％，提示有吸煙以外的其他危險因素在女性肺癌的發(fā)生中起重要作用。人乳頭瘤病毒HPV是一種DNA病毒，感染人和動物的皮膚或粘膜可引起增殖

2、性損傷。已有研究表明HPV感染與泌尿生殖道、食管、頭頸部、呼吸道等多個部位的腫瘤發(fā)生有關(guān)。隨著分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)的發(fā)展，不斷有從肺癌組織中檢出HPV DNA相關(guān)序列的文獻(xiàn)報道，提示HPV感染可能與肺癌的發(fā)生有關(guān)，但HPV致肺癌發(fā)生的機(jī)制目前仍不清楚。 脆性組氨酸三聯(lián)體基因FHIT是一個重要的抑癌基因。該基因定位于染色體3p14.2上，占據(jù)1Mb大小的位置，覆蓋FRA3B脆性位點(diǎn)、腎細(xì)胞癌相關(guān)性斷裂點(diǎn)t(3；8)、抑癌基因γ蛋白質(zhì)

3、酪氨酸磷酸酶基因PTPRG的5’末端及HPV 16整合位點(diǎn)，并含有編碼組氨酸三聯(lián)體的功能。有研究表明，在HPV感染相關(guān)的腫瘤中，F(xiàn)HIT基因易發(fā)生雜合子丟失和mRNA水平上的表達(dá)缺失，因此有學(xué)者認(rèn)為HPV病毒DNA的插入對于FHIT基因的缺失有重要的影響，提示FHIT基因的缺失可能是HPV感染導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的重要機(jī)制之一。 本研究應(yīng)用高靈敏度的PCR技術(shù)檢測非吸煙女性肺癌組織及對照組織中的HPV DNA序列，巢式RT-PCR法檢測

4、FHIT基因mRNA在組織中的表達(dá)，探討HPV感染、FHIT基因缺失與非吸煙女性肺癌發(fā)生的相關(guān)性，HPV感染對FHIT基因缺失的影響以及HPV感染與FHIT基因缺失對非吸煙女性肺癌影響的交互作用。 材料與方法: 肺癌組織標(biāo)本取自遼寧省腫瘤醫(yī)院和中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院入院的非吸煙女性原發(fā)性肺癌患者，所有病例術(shù)前均未接受化學(xué)治療及放射治療，經(jīng)病理學(xué)診斷為肺癌，實(shí)際收集有效病例60例，其中腺癌37例，鱗癌23例。對照為非吸煙

5、女性，按年齡(±5歲)與病例頻數(shù)匹配，標(biāo)本為肺部良性病變(氣胸14例，支氣管擴(kuò)張29例，肺結(jié)核球17例)病理標(biāo)本，標(biāo)本收集分類標(biāo)記后-80℃深凍保存。同時收集病例及對照的個人一般狀況，生活條件，方式與習(xí)慣，飲食習(xí)慣與種類，個人既往疾病史，家族疾病及癌癥史，精神心理因素等。TRIzol試劑提取組織RNA及DNA，PCR擴(kuò)增HPV相對保守的L1區(qū)片段及HPV 16、18型特異片斷，同時采用RT-PCR方法檢測組織中FHIT基因mRNA水平的

6、表達(dá)。建立SPSS 13.0數(shù)據(jù)庫，采用χ2檢驗(yàn)和Fisher確切概率法分析HPV感染、FHIT基因缺失與非吸煙女性肺癌危險度，以及肺癌組織中HPV感染與FHIT基因缺失的相關(guān)性。叉生法分析HPV感染與FHIT轉(zhuǎn)錄本缺失對非吸煙女性肺癌影響的交互作用，計算交互作用超額相對危險度(RERI)，交互作用指數(shù)(S)，歸因交互效應(yīng)百分比(AP)，檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)均為α=0.05。 結(jié)果: HPV通用序列L1、HPV16、18特異序列在肺

7、癌組織中的檢出率分別為31.67％(19/60)，20.00％(12/60)和18.33％(11/60)，肺癌組與對照組相比HPV 16感染有顯著性差異，HPV16感染的非吸煙女性患肺癌的危險度是未感染者的3.500倍。FHIT基因mRNA在肺癌組織中表達(dá)率為55.00％(33/60)，與對照組織相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。HPV DNA檢出陽性的肺癌組織中FHIT轉(zhuǎn)錄本缺失率更高(73.68％)，HPV 16感染的女性肺癌患者發(fā)生FHIT基

8、因mRNA缺失的危險度是未感染者的5.435倍。用叉生法分析HPV感染與FHIT轉(zhuǎn)錄本缺失之間的交互作用時發(fā)現(xiàn)，HPV 16感染與FHIF基因缺失對非吸煙女性肺癌的影響存在正相加模型交互作用。 結(jié)論: 1、肺癌組與對照組相比，HPV DNA檢出率較高，HPV 16感染是非吸煙女性肺癌的危險因素； 2、肺癌組織中FHIT基因轉(zhuǎn)錄本缺失頻率高于對照組織，HPV 16感染增加了肺癌組織中該基因轉(zhuǎn)錄本的缺失頻率；