1、目的： 1)觀察Sonic hedgehog(Shh)信號通路及其下游靶基因Nmyc在人髓母細胞瘤(medulloblastoma，MB)中的表達情況； 2)分析白藜蘆醇(resveratrol，Res)對人MB細胞系UW228-2和UW228-3的Shh信號通路及其下游靶基因Nmyc表達的影響，探討Res對人MB作用的分子機制，從而為臨床改善MB的治療現(xiàn)狀提供理論依據(jù)。 方法： 從臨床收集18例人MB腦

2、組織及11例大鼠腦組織的石蠟包埋標本，利用自行研制的組織微陣列儀制成石蠟組織微陣列，進行Shh和Glil的免疫組織化學染色(IHC)，觀察這些因子在人MB及大鼠腦組織中的表達情況。UW228-2、-3細胞系培養(yǎng)于含有10％胎牛血清的DMEM(Dulbecco's Modified Eagle’s Medium)培養(yǎng)基中，用100μM Res處理細胞48h。為便于細胞形態(tài)觀察和免疫細胞化學染色(ICC)，將無菌細胞爬片預先置于培養(yǎng)皿中，取

3、出時用冷丙酮固定。同時制備細胞懸液并離心沉淀用于RNA和蛋白質的提取。采用RT-PCR、Western-Blotting和ICC等方法分析Res處理前后UW228-2，UW228-3中Shh、Glil和Nmyc的表達改變情況。 結果： 1)Shh和Glil在人MB組織中染色陽性率分別為88.89％和94．44％，均強于對照組； 2)Res有效抑制UW228-2、-3生長，誘導其分化和調亡，在mRNA和蛋白水平上，

4、Res下調Shh、Glil和Nmyc的表達。 結論： 1)人MB組織中Shh、Glil和Nmyc的表達高于對照組。因此，Shh信號通路在大多數(shù)人MB中處于活化狀態(tài); 2)首次發(fā)現(xiàn)，Res在抑制人MB細胞系UW228-2、-3細胞增殖，促進分化并誘導凋亡的同時，還在mRNA和蛋白水平抑制Shh、Glil和Nmyc的轉錄與產生。Res對人MB細胞Shh信號通路的抑制可能與其增殖抑制、促分化和凋亡功能有某種內在聯(lián)系。