1、目的：1)檢測在體情況下人髓母細胞瘤組織中凋亡相關蛋白caspase8的表達特點；2)研究人髓母細胞瘤細胞系UW228-2和-3凋亡相關蛋白caspase8及細胞周期相關蛋白cyclinA、cyclinB1和cdc25A的表達情況；3)探討白藜蘆醇對caspase8、cyclinA、cyclinB1和cdc25A表達的影響；4)觀察反義寡核苷酸封閉c-Myc基因后cyclinA和cyclinB1表達水平的變化。通過上述研究，進一步了解白

2、藜蘆醇誘導人髓母細胞瘤細胞凋亡和細胞周期阻滯的分子機制，以期加深對髓母細胞瘤分子生物學特點的認識，為改善臨床髓母細胞瘤的治療現(xiàn)狀提供新的實驗室指標和理論根據(jù)。 方法：人髓母細胞瘤細胞系UW228-2和-3培養(yǎng)于含有10﹪胎牛血清的DMEM(Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium，GIBCO)培養(yǎng)基中，分別用100μM白藜蘆醇(resveratrol)及0.6μMc-Myc反義寡核苷酸處理細胞，觀察它們對靶

3、細胞的作用特點；采取臺盼藍計數(shù)法對細胞的增殖活性進行檢測；采用免疫細胞化學、Westernblot和RT-PCR等方法分析各實驗組中caspase8、cyclinA、cyclinB1和cdc25A基因表達水平的改變以及與白藜蘆醇誘導的細胞凋亡和細胞周期阻滯的關系。將臨床收集的石蠟包埋標本(髓母細胞瘤及瘤旁相對正常腦組織)制成石蠟組織陣列，進行caspase8的免疫組織化學染色。采用流式細胞技術檢測白藜蘆醇對UW228-2和-3細胞系細胞

4、周期及細胞凋亡情況的影響。通過陽離子脂質體轉染UW228-2細胞封閉c-Myc基因，來觀察cyclinA、cyclinB1表達的變化。 結果：1)在10例人髓母細胞瘤組織中，僅有5例caspase8表達陽性，且與瘤旁相對正常腦組織相比，表達水平降低；2)白藜蘆醇處理后UW228-2細胞caspase8的表達明顯升高，且免疫細胞化學結果顯示大部分細胞出現(xiàn)核內著色的情況，而在UW228-3細胞升高不明顯；3)經(jīng)白藜蘆醇處理后，cyc

5、linA和cyclinB1mRNA的表達下調，cdc25AmRNA的表達上調；4)與mRNA水平一致，cyclinA蛋白的表達水平也呈現(xiàn)下調；5)在UW228-2中，用反義寡核苷酸阻斷c-Myc基因的表達后，cyclinA和cyclinB1的mRNA水平均降低。 結論：1)Capase8在髓母細胞瘤中表達下調；2)白藜蘆醇不僅可以上調caspase8在髓母細胞瘤中的表達，而且能促進caspase8的活化；3)白藜蘆醇可能通過抑制