1、白血病是嚴(yán)重危害人類健康的造血系統(tǒng)惡性腫瘤,尋找新的治療白血病的策略成為目前關(guān)注的焦點(diǎn)。天然植物中分離的活性成分是抗腫瘤藥物的重要來(lái)源,人們從天然植物中分離到多種抗腫瘤活性成分,這些活性成分針對(duì)特異性的分子靶點(diǎn)調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡,從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。異硫氰酸芐酯(benzylisothiocyanate,BITC)是一種具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的天然物質(zhì),存在于十字花科植物中,屬于異硫氰酸酯類化合物。近年來(lái),由于其顯著的抗癌作用,成

2、為抗癌藥物研究的熱點(diǎn)。
　　抗凋亡蛋白Mcl-1為Bcl-2家族成員之一,在細(xì)胞發(fā)育和分化過(guò)程中起著重要作用,具有很短的半衰期。在轉(zhuǎn)錄翻譯以及蛋白降解等多個(gè)環(huán)節(jié),Mcl-1基因的表達(dá)均可受到調(diào)控,在不同的因素作用下表現(xiàn)為不同的分子機(jī)制。白血病細(xì)胞和其它實(shí)體瘤細(xì)胞中常有Mcl-1高表達(dá),體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Mcl-1的下調(diào)可引起多種腫瘤細(xì)胞細(xì)胞凋亡。多項(xiàng)研究說(shuō)明Mcl-1與白血病的發(fā)生有密切聯(lián)系,Mcl-1在其中可能起著重要的作用。但其具體

3、作用機(jī)制尚不清楚。因此深入研究異硫氰酸芐酯誘導(dǎo)Mcl-1下調(diào)的分子機(jī)制,明確其作用的分子靶點(diǎn),對(duì)于腫瘤的預(yù)防和治療具有重要意義。
　　本文利用Jurkat、HL60、U937等多種白血病細(xì)胞株、臨床白血病人細(xì)胞以及裸鼠異種移植瘤模型,采用流式細(xì)胞術(shù)、免疫沉淀、免疫印跡、抑制劑和分子克隆干擾等方法深入研究BITC誘導(dǎo)多種人白血病細(xì)胞以及臨床病人白血病細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期阻滯的機(jī)制;探索BITC對(duì)Mcl-1基因轉(zhuǎn)錄、翻譯以及蛋白泛素化過(guò)

4、程的影響,明確Mcl-1在其中的分子機(jī)制。通過(guò)研究,我們發(fā)現(xiàn)BITC明顯誘導(dǎo)白血病細(xì)胞線粒體損傷和凋亡,并促使caspase途徑激活,細(xì)胞色素C的釋放,AIF的核聚集,Bax的轉(zhuǎn)位和Mcl-1蛋白的下調(diào),且呈現(xiàn)明顯的時(shí)效和量效關(guān)系。BITC將細(xì)胞阻滯在G2/M期,并且阻滯于該期的細(xì)胞,對(duì)Mcl-1的下調(diào)和BITC誘導(dǎo)的凋亡也更加敏感。我們還采用RT-PCR,脈沖追蹤,報(bào)告基因分析等實(shí)驗(yàn),證實(shí)了相對(duì)于轉(zhuǎn)錄水平,翻譯后水平和caspase途