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![單純環(huán)境因素誘導(dǎo)的小鼠干眼模型.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/0d514389-719e-430e-90fd-fdb71cb0940a/0d514389-719e-430e-90fd-fdb71cb0940a1.gif)
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1、目的:創(chuàng)建智能環(huán)境控制系統(tǒng)(IntelligentControlledEnvironmentalSystem,ICES),有效調(diào)控環(huán)境濕度(RelativeHumidity,RH)、溫度(Temperature,T)和氣體流量(Airflow,AF),并應(yīng)用ICES創(chuàng)建一個(gè)單純環(huán)境因素誘導(dǎo)的小鼠干眼模型。 方法:創(chuàng)建智能環(huán)境控制系統(tǒng),應(yīng)用一種新型分子吸濕劑(分子篩),通過兩階梯除濕法降低實(shí)驗(yàn)環(huán)境的相對(duì)濕度(RH),并利用空調(diào)控制
2、環(huán)境溫度(T)、內(nèi)置可調(diào)速風(fēng)扇控制風(fēng)速(WV),從而有效控制濕度、濕度和氣體流量。將30只4-6周齡的雌性Balb/c小鼠飼養(yǎng)于ICES中,在特定實(shí)驗(yàn)環(huán)境下(RH15±3%,AF=2.1±0.2m/s,T:21-23℃)淆導(dǎo)模型,同時(shí)在正常環(huán)境(RH:60%-80%,noAF,T:21-23℃)中設(shè)置對(duì)照組。應(yīng)用酚紅棉線試驗(yàn)、角膜熒光素染色、組織病理切片、掃描電鏡和免疫熒光等方法,于第3、7、14、28和42天分期觀測(cè)淚液分泌量,角膜屏
3、障功能,眼表上皮形態(tài)以及凋亡標(biāo)志物表達(dá)的改變。應(yīng)用免疫熒光法,于第42天,檢測(cè)跟表上皮細(xì)胞凋亡標(biāo)志物(activecaspase-3)表達(dá)的改變。 結(jié)果:智能環(huán)境控制系統(tǒng)可快速負(fù)反饋調(diào)控環(huán)境濕度至實(shí)驗(yàn)需求水平,可使溫度、濕度和氣體流量同時(shí)得到有效調(diào)控。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照韁小鼠在基點(diǎn)處各觀測(cè)指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組小鼠在ICES巾飼養(yǎng)3天和7天后,淚液分泌量較對(duì)照組無明顯減少(P>0.05),而在14、28和42天淚液分泌量明顯減少
4、,各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組小鼠在ICES中飼養(yǎng)3天和7天后,角膜熒光素染色程度較對(duì)照組無明顯差異(P>0.05),在14、28和42天角膜熒光素染色程度明顯加重,各時(shí)間點(diǎn)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組小鼠在ICES中飼養(yǎng)3大和7天后,角膜上皮形態(tài)無明顯改變,在14、28和42天角膜上皮明顯變薄且上皮細(xì)胞排列紊亂。打描電鏡檢查顯示對(duì)照組小鼠角膜上皮細(xì)胞表面微皺襞和微絨毛分布均勻,細(xì)胞間呈緊密連接。在14、28
5、和42天實(shí)驗(yàn)組小鼠角膜上皮表明脫落細(xì)胞增加,微皺襞和微絨毛大量丟失,表層細(xì)胞間連接呈縫隙改變,而在第3和第7天,無明顯改變。和對(duì)照組小鼠相比,在14、28和42天實(shí)驗(yàn)組小鼠結(jié)膜上皮鱗狀化生,杯:狀細(xì)胞密度下降,上皮細(xì)胞層次增加且排列異常紊亂。存第42天,限表(結(jié)膜、角膜)上皮出現(xiàn)凋亡標(biāo)志物(activecaspase-3)高表達(dá)。 結(jié)論:低濕、高氣體流量的壞境會(huì)導(dǎo)致正常小鼠淚液分泌量減少,并出現(xiàn)與臨床干眼的相似的眼表上皮病變以及
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