單純環(huán)境因素誘導(dǎo)的小鼠干眼模型眼表免疫機(jī)制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的: 研究單純環(huán)境因素建立的小鼠干眼模型T細(xì)胞表面標(biāo)志物CD4+在結(jié)膜、瞼板腺的表達(dá)及炎癥激活標(biāo)志物MHC-Ⅱ分子在角膜上皮的表達(dá)。 方法: 將64只4-6周齡的雌性balb/c小鼠隨機(jī)分為兩組,32只小鼠飼養(yǎng)于環(huán)境智能控制干燥系統(tǒng)(ICES)中(RH15±3%,AF=2.1±0.2 m/s,T:21-23℃)作為實(shí)驗(yàn)組。32只balb/c小鼠飼養(yǎng)于正常環(huán)境(RH:70%-80%,no AF,T:21-23℃)

2、作為對(duì)照組。于第0、14、28天和42天分期觀察角膜熒光素染色,結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度變化,結(jié)膜、瞼板腺中T細(xì)胞表面標(biāo)記CD4+的表達(dá)及免疫炎癥標(biāo)記物MHC-Ⅱ分子在角膜上皮的表達(dá)。 結(jié)果: 1.實(shí)驗(yàn)組小鼠置于ICES后角膜熒光素染色程度逐漸加重,0天、14天、28天和42天角膜熒光素染色評(píng)分分別為0.9±0.8,6.0±1.1,10.3±1.0,13.1±0.8,驗(yàn)后多重比較,各時(shí)間點(diǎn)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.008(

3、0天vs.14天),P=0.046(28天vs.42天,14天vs.28天),P<0.001(0天vs.28天,0天vs.42天,14天vs.42天);對(duì)照組小鼠在正常環(huán)境中角膜熒光素染色在0天、14天、28天和42天無明顯差異; 2.實(shí)驗(yàn)組小鼠在ICES中飼養(yǎng)0、14、28、42天后,結(jié)膜中CD4+的表達(dá)逐漸增多,光密度值(IOD)分別為3.6±1.0,13.4±3.9,22.6±2.9及34.7±5.8,驗(yàn)后多重比較,各時(shí)間

4、點(diǎn)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.043(0天vs.14天),P=0.009(28天vs.42天),P=0.035(14天vs.28天),P<0.001(0天vs.28天,0天vs.42天,14天vs.42天);對(duì)照組小鼠在正常環(huán)境下結(jié)膜中CD41細(xì)胞的表達(dá)在0天、14天、28天和42天無明顯差異; 3.實(shí)驗(yàn)組小鼠置于ICES14天、28天、42天(38±4,24±4,10±3)后結(jié)膜杯狀細(xì)胞和0天(57±5)相比數(shù)量逐漸減少,驗(yàn)

5、后多重比較各時(shí)間點(diǎn)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.012(0天vs.14天),P=0.048(28天vs.42天,14天vs.28天),P<0.001(0天vs.28天,0天vs.42天,14天vs.42天),且隨著CD4+T細(xì)胞浸潤(rùn)結(jié)膜程度的不斷加重,杯狀細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,決定系數(shù)為r2=0.809,相關(guān)系數(shù)為-0.908,P<0.01,兩者之間呈負(fù)相關(guān);對(duì)照組小鼠在正常環(huán)境中結(jié)膜杯狀細(xì)胞的數(shù)量在0天、14天、28天和42天無明顯差異

6、; 4.實(shí)驗(yàn)組小鼠瞼板腺中CD4+的表達(dá)于第14天開始逐漸增多,14天(18.4±1.4)、28天(23.9±1.1)和42天(30.1±2.9)與0天(12.1±0.8)相比光密度值均有明顯差異,驗(yàn)后多重比較,各時(shí)間點(diǎn)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.033(0天vs.14天),P=0.008(28天vs.42天),P=0.046(14天vs.28天),P<0.001(0天vs.28天,0天vs.42天,14天vs.42天);對(duì)

7、照組小鼠在正常環(huán)境下瞼板腺中CD4+T的表達(dá)在0天、14天、28天和42天無明顯差異; 5.實(shí)驗(yàn)組小鼠角膜上皮周邊MHC-Ⅱ分子的表達(dá)于14天時(shí)開始增多,14天(118.8±3.4)、28天(158.7±5.7)和42天(190.0±5.8)與0天(94.0±5.1)比MHC-Ⅱ分子的表達(dá)逐漸增多,驗(yàn)后多重比較,各時(shí)間點(diǎn)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.048(0天vs.14天,14天vs.28天,28天vs.42天),P<0.0

8、05(0天vs.28天,0天vs.42天,14天vs.42天);角膜上皮旁中央MHC-Ⅱ分子的表達(dá)于14天時(shí)開始增多,14天(39.7±6.7)、28天(79.3±6.3)和42天(118.3±5.7)與0天(0.2±0.4)比MHC-Ⅱ分子的表達(dá)逐漸增多,各時(shí)間點(diǎn)間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.046(0天vs.14天,14天vs.28天),P=0.048(28天vs.42天),P<0.001(0天vs.28天,0天vs.42天,14天

9、vs.42天);角膜上皮中央MHC-Ⅱ分子的表達(dá)在0天(0.0±0.0)和14天(1.8±0.8)無明顯差異,P>0.1,此后數(shù)量明顯增多,28天(24.7±4.0)與42天(40.0±3.8)表達(dá)逐漸上調(diào),與0天和14天比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.043(28天vs.42天),P=0.002(0天vs.28天),P=0.003(14天vs.28天),P<0.001(0天vs.42天,14天vs.42天);對(duì)照組小鼠在正常環(huán)境中MHC-

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