1、目的:觀察白細(xì)胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白細(xì)胞介素10(interleukin-10,IL-10)在大鼠煙曲霉菌性角膜炎固有免疫階段角膜上皮組織中的表達(dá)并分析其表達(dá)量變化的原因。
　　 方法:健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,在刮除中央?yún)^(qū)角膜上皮的大鼠角膜上涂以煙曲霉菌標(biāo)準(zhǔn)菌落并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立大鼠煙曲霉菌性角膜炎感染模型。大鼠隨機(jī)分為2部分,用于免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)的A1、B1、C1組(每組各6

2、只大鼠)和用于RT-PCR實(shí)驗(yàn)的A2、B2、C2(A2組6只、B2、C2組24只):A1、A2組為空白對照組,不予任何處理:B1、B2組為損傷對照組,建立模型,僅刮除中央?yún)^(qū)角膜上皮后覆蓋角膜接觸鏡,不涂抹真菌;C1、C2組為真菌模型組,建立真菌模型。成功建模后4h打開眼瞼,并于造模后第4h、8h、16h、24h處死大鼠,取角膜上皮組織。HE染色觀察角膜組織病理變化并檢測真菌生長,運(yùn)用免疫組織化學(xué)和RT-PCR技術(shù)檢測各組不同時(shí)間點(diǎn)IL-

3、6與IL-10的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.組織病理學(xué)觀察見真菌性角膜炎病灶內(nèi)有炎癥細(xì)胞浸潤,HE染色檢查在角膜基質(zhì)層可見菌絲及孢子。
　　 2.IL-6在空白對照眼角膜基本不表達(dá)或極微量表達(dá);真菌實(shí)驗(yàn)組在接種真菌后4h開始出現(xiàn)IL-6的表達(dá),并逐漸增高,在第24h表達(dá)量升高顯著,各時(shí)間點(diǎn)比較差異具有顯著性(P＜0.01)。
　　 3.IL-10在空白對照組角膜基本不表達(dá)或極微量表達(dá);真菌實(shí)驗(yàn)組在

4、真菌刺激后4h開始出現(xiàn)IL-10的表達(dá),并逐漸增高,在24h表達(dá)量升高顯著,各時(shí)間點(diǎn)比較差異有顯著性((P＜0.01)。
　　 結(jié)論：1.10%氫氧化鉀涂片及組織刮取物行菌落培養(yǎng)證實(shí)大鼠真菌性角膜炎動(dòng)物模型建立成功。2.IL-6在煙曲霉菌性角膜炎角膜上皮組織中早期即開始表達(dá),表達(dá)量逐漸增高,其表達(dá)量的增高與角膜炎癥程度呈正相關(guān),在大鼠煙曲霉菌性角膜炎病程中是一個(gè)敏感的炎癥因子,能反映局部的炎癥反應(yīng)程度。3.IL-10表達(dá)于真菌性