HPLC法同時(shí)對(duì)大黃3類藥理活性物質(zhì)質(zhì)量控制及指紋圖譜初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、大黃為臨床常用中藥,已有兩千多年治病史,歷代中藥本草典籍中均有記載。在我國(guó)有45個(gè)品種和2個(gè)變種,主要分布于甘肅、青海、四川、陜西、西藏等地。2005版《中國(guó)藥典》收錄的大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大黃Rheum tanguticumMaxim.ex Balf.或藥用大黃Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。大黃性味苦寒,瀉熱通腸、涼血解毒、逐瘀通經(jīng),傳統(tǒng)用于抗菌、瀉下,此外還

2、具有廣譜抗菌、保肝利膽、抗腫瘤、降血脂等廣泛的藥理作用,具有深厚的藥用基礎(chǔ)及巨大的開發(fā)潛力。
   綜合現(xiàn)階段對(duì)大黃藥材質(zhì)量控制研究文獻(xiàn),發(fā)現(xiàn)對(duì)于大黃藥材質(zhì)量控制方法較為集中于薄層色譜定性分析及高效液相色譜定量分析,但均是對(duì)于大黃藥材中某一類或某一種藥理活性成分進(jìn)行檢測(cè)。而大黃的藥理作用發(fā)揮為多靶點(diǎn),各成分相互作用而成。因此,上述方法未能體現(xiàn)出全面綜合控制大黃藥材質(zhì)量,顯示出一定的局限性。因此,本文從定量測(cè)定和定性分析角度切入,

3、采用高效液相色譜法對(duì)29批不同來源的大黃藥材分別進(jìn)行3類不同藥理活性物質(zhì)中5個(gè)活性成分同時(shí)測(cè)定以及指紋圖譜分析,獲得較好結(jié)果。
   首先,本文通過HPLC條件優(yōu)化篩選,建立了同時(shí)測(cè)定大黃藥材中沒食子酸、番瀉苷A、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚的HPLC含量測(cè)定方法,該方法穩(wěn)定可靠,重現(xiàn)性良好。其中番瀉苷A為主要瀉下成分,其次為葸醌類化合物;大黃素、蘆薈大黃素抗菌作用最強(qiáng);沒食子酸、大黃酚主要發(fā)揮止血作用,對(duì)此5種化合物定量檢測(cè)可基

4、本實(shí)現(xiàn)從藥理活性角度對(duì)大黃藥材質(zhì)量綜合控制。實(shí)驗(yàn)中通過對(duì)藥材供試品制備方法的優(yōu)化篩選,本文確定了以甲醇為溶劑進(jìn)行超聲提取,無過多操作,快捷、準(zhǔn)確、無損的含量測(cè)定供試品溶液制備方法,改善了現(xiàn)行供試品制備方法步驟繁多、耗時(shí)長(zhǎng)、實(shí)際操作中易造成損失的弊端。其次,本文在對(duì)大黃HPLC色譜條件優(yōu)化篩選后,初步建立了大黃HPLC指紋圖譜。該方法可使樣品中不同極性組分得到合適的保留,在75min內(nèi)各組分全部出峰,色譜峰數(shù)達(dá)到50個(gè)左右。對(duì)29批不同來

5、源大黃藥材測(cè)定分析后,共檢識(shí)出30個(gè)共有指紋峰,將大黃藥材圖譜劃分為4個(gè)指紋區(qū)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較分析后得知,各品種所含化學(xué)成分種類及含量均有一定差異,驗(yàn)證了大黃藥材為多品種來源,故應(yīng)針對(duì)不同品種建立相應(yīng)的指紋圖譜。
   本論文著重從HPLC含量測(cè)定和化學(xué)指紋圖譜建立過程中色譜條件優(yōu)化的方法和步驟進(jìn)行大黃質(zhì)量控制方法的探討,力求從藥理作用角度獲得對(duì)大黃藥材化學(xué)成分的定量含量和定性種類進(jìn)行進(jìn)一步研究,為建立全面、綜合的大黃藥材質(zhì)量

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