中溫木糖發(fā)酵產氫菌的分離及其產氫特性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、底物已經成為限制生物制氫發(fā)展的重要因素,采用廉價的底物無疑會降低制氫成本,從而促使該技術能夠得到更好的推廣。半纖維素廣泛存在于纖維素類生物質中,如果能將其用于發(fā)酵產氫,則纖維質就能夠更加充分的被利用。禾本科植物的半纖維素主要是木聚糖類,在酶或者酸的作用下水解,可得到木糖含量較高的水解液。本研究立足于利用半纖維素水解產物——木糖發(fā)酵產氫,篩選高效木糖降解產氫菌,對其產氫特性進行研究,優(yōu)化發(fā)酵產氫的條件,以期獲得更高的產氫能力。
  

2、本試驗從牛糞堆肥中成功篩選出了7株中溫發(fā)酵木糖產氫菌,通過對這7株菌進行優(yōu)選,發(fā)現菌株HR-1的產氫能力最強,單位體積產氫量(YH2)為1311mL/L-培養(yǎng)基。HR-1為單胞生長的規(guī)則桿狀菌,革蘭氏陽性,無莢膜、無鞭毛、表面光滑、無明顯凸起,專性厭氧。HR-1可在10~41℃,pH4.0~12.0條件下生長;37℃和pH8.0分別為最適生長條件;發(fā)酵葡萄糖的主要產物有H2、CO2、乙酸、丁酸,未檢測到琥珀酸和丁二醇;可利用多種碳源生長

3、;其耐鹽性為0~2%;HR-1可以利用磷酸氫二銨和硝酸鹽生長,有機氮不是其必需的氮源。通過16S rRNA鑒定,表明與丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum824)的相似性最高,為96%,初步認為該菌是梭菌屬的一個新種,命名為Clostridium sp. HR-1。
  通過間歇培養(yǎng)試驗,考察了初始pH、不同氮源、碳源濃度、不同碳源對HR-1利用木糖發(fā)酵產氫的影響。結果表明:該菌株的最佳生長初始pH為

4、8.0,最佳產氫初始pH為6.5;它可以利用NH4Cl、酵母浸粉、尿素作為氮源進行發(fā)酵產氫,其中酵母浸粉效果最好;HR-1利用木糖發(fā)酵產氫的最適濃度為20g/L;HR-1不能利用阿拉伯糖發(fā)酵產氫,但可以利用半乳糖、纖維二糖、葡萄糖、甘露糖、葡聚糖發(fā)酵產氫,因此推斷該菌株可以很好的利用半纖維素的水解液發(fā)酵產氫。
  比較了中溫產氫菌HR-1利用五碳糖、六碳糖及二者等比例混合糖發(fā)酵產氫的特性,發(fā)現HR-1更容易利用六碳糖合成細胞及發(fā)酵

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