1、前言：
　　 越來越多的證據(jù)表明肥胖、代謝綜合征(MS)與白蛋白尿以及慢性腎臟病密切相關(guān)。肥胖時(shí)存在幾種病理生理紊亂:炎癥、氧化應(yīng)激、脂肪因子改變、胰島素抵抗、腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活、巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換以及腎臟局部脂代謝異常,都能促進(jìn)腎臟損傷。研究顯示在肝臟、肌肉組織以及某些細(xì)胞系,持續(xù)活化AMP激活的蛋白激酶(AMPK)可以減少組織細(xì)胞中脂質(zhì)沉積,減輕炎癥及氧化損傷。有研究報(bào)道,二甲雙胍可通過激活肝臟以及肌肉中AMPK

2、,改善胰島素抵抗。由此,我們推測二甲雙胍可能通過激活腎臟AMPK減輕高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠腎臟損傷。
　　 目的：
　　 觀察高脂飲食C57BL/6J小鼠腎臟AMPK活性的變化及二甲雙胍對高脂飲食誘導(dǎo)的腎臟損傷的改善作用。
　　 方法：
　　 6周齡的雄性C57BL/6J小鼠32只,隨機(jī)分為2組:普通飲食組(ND),給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)(15%能量由脂肪提供,n=8);高脂飲食組(HFD),給予高脂飼料喂養(yǎng)(

3、59%能量由脂肪提供,n=24)。8周后根據(jù)體重將達(dá)到肥胖標(biāo)準(zhǔn)的HFD小鼠選出16只隨機(jī)分成2組:高脂飲食組,繼續(xù)給予高脂飲食(n=8);二甲雙胍干預(yù)組(M),給予高脂飲食和二甲雙胍(75mg·kg-1·d-1)灌胃(n=8)。繼續(xù)喂養(yǎng)4周,應(yīng)用體重及血生化指標(biāo)對模型進(jìn)行評價(jià);Folch法提取腎臟脂質(zhì),酶法檢測:光鏡觀察腎臟組織結(jié)構(gòu)變化;Realtime-PCR檢測腎皮質(zhì)固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)-1c、過氧化物酶體增殖物激活受

4、體γ輔激活子(PGC)-1α、腫瘤壞死因子(TNF)-α、NADPH氧化酶(NOX)4mRNA表達(dá);Westernblot法檢測腎臟p-AMPKα蛋白表達(dá);對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析及相關(guān)性分析。
　　 結(jié)果：
　　 1、與ND組相比,HFD組小鼠體重(BW)明顯增加(25.44±0.68gVS32.75±1.69g,P＜0.01),血甘油三酯(TG)和空腹血胰島素(FINS)升高(0.42±0.04mmol/LVS0.8

5、4±0.41mmol/L,P＜D.05;8.92±3.31mU/LVS15.37±5.10mU/L,P＜0.05),胰島素敏感指數(shù)(ISI)降低(11.23±3.90VS6.56±2.97,P＜0.05),血清高密度脂蛋白(HDL)明顯減低(1.03±0.08mmol/LVS0.89±0.09mmol/L,P＜0.05)。與HFD組小鼠相比,M組小鼠BW、FINS降低(分別為:32.75±1.69gVS27.12±1.22g,P＜0.0

6、1:15.37±5.10mU/LVS9.31±3.62mU/L,P＜0.05),ISI和血HDL升高(分別為:6.56±2.97VS11.00±3.14,P＜0.05;0.89±0.09mmol/LVS1.01±0.10mmol/L,P＜0.05)。
　　 2、與ND組相比,HFD組小鼠腎皮質(zhì)TG含量明顯增加(0.73±0.24mmol/LVS1.35±0.38mmol/L,P＜0.05),但膽固醇(TC)無明顯改變,尿蛋白增多

7、(0.98±0.27mg/24hVS2.02±0.58mg/24h,P＜0.01),油紅O染色顯示腎小球及小管明顯的脂質(zhì)沉積,Masson染色及HE染色顯示高脂喂養(yǎng)的小鼠腎小球肥大、系膜細(xì)胞及系膜基質(zhì)增生。與HFD組小鼠相比,M組小鼠腎臟甘油三酯含量及尿蛋白量明顯減低(1.35±0.38mmol/LVS0.79±0.26mmol/L,P＜0.01;2.02±0.58mg/24hVS1.45±0.27mg/24h,P＜0.05),上述病理

8、改變減輕。
　　 3、與ND組相比,HFD組大鼠腎皮質(zhì)p-AMPKα蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(0.23±0.10VS0.11±0.06,P＜0.05):TNF-α、NOX4、PGC-1αmRNA表達(dá)顯著增加(分別為:2.55±0.84VS5.96±1.02,P＜0.01:6.96±4.57VS13.68±3.42,P＜0.05;3.75±0.43VS6.00±1.15,P＜0.05),SREBP-1mRNA表達(dá)未見明顯改變(1.93±0

9、.68VS1.60±0.20,P＞0.05)。與HFD組相比,M組經(jīng)二甲雙胍干預(yù)后小鼠腎皮質(zhì)p-AMPKα蛋白表達(dá)增加(0.11±0.06VS0.21±0.06,P＜0.05);TNF-α、NOX4mRNA表達(dá)下調(diào)(分別為:5.96±1.02VS3.68±0.48,P＜0.01;13.68±3.42VS7.17±1.98,P＜0.05)。
　　 4、相關(guān)性分析顯示,HFD組和M組小鼠腎皮質(zhì)p-AMPKα蛋白相對表達(dá)量與TNF-α

10、、NOX4mRNA相對表達(dá)量及腎皮質(zhì)TG含量、腎小球內(nèi)徑、尿蛋白量呈負(fù)相關(guān)(分別為:r=-0.807,P＜0.01;r=-0.537,P＜0.05;r=-0.922,P＜0.01;r=-0.613,P＜0.05;r=-0.573,P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.高脂喂養(yǎng)C57BL/6J小鼠12周后成功建立肥胖相關(guān)性腎病模型,具體表現(xiàn)為:肥胖、腎小球肥大以及蛋白尿。
　　 2.二甲雙胍治療可改善肥胖小鼠代