1、第一部分血管緊張素Ⅱ?qū)Π籽〖?xì)胞增殖的作用及其受體的分布 目的：研究血管緊張素Ⅱ?qū)Π籽〖?xì)胞增殖的影響和血管緊張素Ⅱ受體在白血病患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞上的表達(dá)，探討其與白血病發(fā)生發(fā)展的可能關(guān)系。為研究白血病發(fā)病機(jī)制提供新思路。 方法：1.收集初治急性白血病患者的骨髓單個(gè)核細(xì)胞，以血小板減少性紫癜患者作為對照組。運(yùn)用免疫組化方法檢測細(xì)胞血管緊張素Ⅱ受體蛋白表達(dá)。2.以人白血病細(xì)胞系K562為研究對象，采用RPMI-1640培養(yǎng)

2、基進(jìn)行體外培養(yǎng)，以終濃度為0、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的AngⅡ，分別在6h，12h，24h，48h作用于K562細(xì)胞，MTT法檢測K562細(xì)胞增殖率。 結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示AT1R與AT2R在對照組及白血病患者單個(gè)核細(xì)胞的胞膜和胞漿中均有表達(dá)。白血病患者AT1R蛋白的表達(dá)顯著高于AT2R蛋白的表達(dá)(P＜0.05)，正常對照組AT1R蛋白較AT2R蛋白表達(dá)水平低，但差異無顯著性。K562細(xì)胞的增殖在一定

3、范圍內(nèi)與AngⅡ濃度及作用時(shí)間呈正相關(guān)，在10-7mol/L作用6、12小時(shí)的增殖效率最顯著。 結(jié)論：白血病患者的骨髓單個(gè)核細(xì)胞胞膜和胞漿中部存在AngⅡ受體的表達(dá)，AT1R在白血病細(xì)胞上的優(yōu)勢表達(dá)可能是促進(jìn)白血病發(fā)生發(fā)展的重要因素。AngⅡ能以時(shí)間和劑量依賴的方式促進(jìn)白血病細(xì)胞的增殖。 第二部分血管緊張素Ⅱ促進(jìn)白血病細(xì)胞增殖機(jī)制的初步研究 目的：研究受體拮抗劑對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)促進(jìn)K562細(xì)胞增殖的影響

4、，及AngⅡ?qū)562細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)的作用，探討AngⅡ促進(jìn)白血病細(xì)胞增殖的作用機(jī)理和途徑。 方法：以人白血病K562細(xì)胞系為研究對象，采用RPMI-1640培養(yǎng)基進(jìn)行體外培養(yǎng)，分別以AT1R和AT2R的拮抗劑(Valsartan和PD123319)預(yù)處理K562細(xì)胞30min，以MTT法觀察它們對血管緊張素Ⅱ促K562細(xì)胞增殖的影響。通過ELISA方法分析AngⅡ?qū)562細(xì)胞分泌VEGF的調(diào)節(jié)。

5、 結(jié)果：AngⅡ(10-7mol/L)引起K562細(xì)胞明顯增殖，AT1R拮抗劑Valsartan(10-6mol/L)能完全抑制AngⅡ的促增殖效應(yīng)，而AT2R拮抗劑PD123319對AngⅡ的增殖效應(yīng)無明顯影響。Valsartan單獨(dú)作用不引起K562細(xì)胞凋亡。AngⅡ使K562細(xì)胞分泌的VEGF升高，而AT1R的拮抗劑Valsartan能有效的抑制AngⅡ的效應(yīng)。 結(jié)論：AngⅡ通過激活A(yù)T1R促進(jìn)K562細(xì)胞增殖。另外