營(yíng)養(yǎng)脅迫條件下牦牛皮下脂肪和背肌差異microRNAs的篩選與鑒定.pdf_第1頁(yè)
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1、牦牛(Bos gruniens)分布在青藏高原及其毗鄰的高海拔地區(qū),由于受高海拔條件及非地帶性高原山地氣候的制約,牦牛體內(nèi)脂肪和肌肉呈現(xiàn)“波浪式”的消長(zhǎng)方式。在牧草充足的暖季,牦牛體重迅速增長(zhǎng),體內(nèi)肌肉及脂肪組織都得到快速生長(zhǎng)與囤積;而在冷季,在長(zhǎng)達(dá)7個(gè)月的枯草期后體重下降至暖季的70%左右,體內(nèi)肌肉與脂肪組織均大量消耗。本研究采用高通量測(cè)序技術(shù),研究冷季及暖季末期牦牛皮下脂肪及肌肉組織中差異表達(dá)的microRNA及其功能,以探索mic

2、roRNA在營(yíng)養(yǎng)脅迫下對(duì)牦牛脂肪及肌肉代謝平衡的調(diào)控作用。研究結(jié)果如下:
  1.構(gòu)建冷季皮下脂、暖季皮下脂、冷季背最長(zhǎng)肌以及暖季背最長(zhǎng)肌四個(gè)小RNA文庫(kù),經(jīng)Solexa測(cè)序得到的純凈讀數(shù)均為24M。在四個(gè)文庫(kù)中,長(zhǎng)度為22 nt的microRNA數(shù)量最多。
  2.在牦牛皮下脂肪microRNA文庫(kù)中,鑒定到450個(gè)microRNA,其中70個(gè)microRNA在兩個(gè)季節(jié)皮下脂肪組織的表達(dá)量達(dá)到差異顯著水平(P<0.05)。

3、在表達(dá)差異顯著的microRNA中,miR-335、miR-378b、miR-200a、miR-200b、miR-200c及miR-210對(duì)牦牛脂肪代謝起到調(diào)控作用。
  3.在牦牛背最長(zhǎng)肌microRNA文庫(kù)中,鑒定到344個(gè)microRNA。79個(gè)microRNA在兩個(gè)季節(jié)背最長(zhǎng)肌組織中的表達(dá)量達(dá)到差異顯著水平(P<0.05),其中miR-133b、miR-378、miR-378c、miR-29a、miR-29b和miR-29

4、c對(duì)牦牛肌肉代謝起到調(diào)控作用。
  4.皮下脂肪組織差異表達(dá)microRNA預(yù)測(cè)到815個(gè)達(dá)到顯著水平的靶基因,顯著富集在脂肪細(xì)胞生成與代謝、脂肪酸的合成與分解等77個(gè)通路中(P<0.05);背最長(zhǎng)肌組織共預(yù)測(cè)到1315個(gè)達(dá)到顯著水平的靶基因,靶基因在骨骼肌發(fā)育、蛋白質(zhì)合成及氨基酸生成等99個(gè)通路中顯著富集(P<0.05)。
  綜上所述,本研究通過(guò)Solexa高通量測(cè)序,篩選冷暖兩季牦牛皮下脂肪及背最長(zhǎng)肌組織microRN

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