1、宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，全球每年約有50萬新增病例，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，僅次于乳腺癌。人類乳頭瘤病毒HPV(HumanPapillomavirus，HPV)屬乳頭瘤病毒科乳頭瘤病毒屬，為無包膜DNA病毒，主要引起人類皮膚粘膜的增生性病變。大量分子流行病學(xué)和分子生物學(xué)研究已經(jīng)證明，高危型人類乳頭瘤病毒誘發(fā)宮頸癌，HPV58型在我國宮頸癌婦女中是繼HPV16和18之后的第三重要型別，由于HPV具有嚴(yán)格的種屬特異性且其增殖

2、嚴(yán)格依賴宿主細(xì)胞的分化狀態(tài)，使得其難以在體外培養(yǎng)，使得傳統(tǒng)的滅活及減毒疫苗難以進(jìn)展，所以研究的重點(diǎn)走向了基因工程疫苗，HPVL1蛋白形成的病樣顆粒VLP(virus-like-Particle)是HPV疫苗的主要形式，在HPVVLP疫苗的研制中，如何以簡便高效的制備結(jié)構(gòu)完整、免疫原性強(qiáng)的VLP是所有問題的關(guān)鍵。
　　本研究利用重組表達(dá)質(zhì)粒pGex-6p-1-HPV58-L1轉(zhuǎn)入大腸桿菌E.coliBL21表達(dá)HPV58L1蛋白，通

3、過對(duì)誘導(dǎo)劑IPTG的濃度、誘導(dǎo)時(shí)間以及誘導(dǎo)溫度等條件的優(yōu)化，篩選出最佳條件;由于HPV58L1蛋白的空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜性等因素，使表達(dá)的目的蛋白易形成包涵體，我們通過包涵體復(fù)性的辦法，使目的蛋白的生物活性得以恢復(fù)，同時(shí)對(duì)目的蛋白的可溶性表達(dá)進(jìn)行了探索，轉(zhuǎn)入伴侶分子，同時(shí)通過不同溫度的誘導(dǎo)，得到的最佳條件是15℃低溫誘導(dǎo)表達(dá)的重組蛋白可溶性最好，并進(jìn)行過柱純化目的蛋白，westernblotting鑒定，結(jié)果顯示表達(dá)的HPV58L1蛋白能與HP