1、危害菊花的病毒種類很多，已報(bào)道的有20余種，我國(guó)初步鑒定出7種。對(duì)于我國(guó)來(lái)說(shuō)，相當(dāng)一部分的菊花病毒病都屬于檢疫性病害。因此菊花病毒檢測(cè)方法的研究，對(duì)我國(guó)菊花產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要意義。匍匐小菊是通過(guò)抗逆性強(qiáng)的野生小菊與分枝性強(qiáng)且生長(zhǎng)速度快的野生小菊雜交而育成的新種，該種植株低矮，生長(zhǎng)速度快，是極好綠化材料。為了能夠使用轉(zhuǎn)基因技術(shù)對(duì)匍匐小菊進(jìn)行改良，建立其組織培養(yǎng)再生系統(tǒng)是必要的。本研究以四個(gè)菊花品種為材料，研究了PT-PCR檢測(cè)CVB、TA

2、V、CChMVd的技術(shù)；以匍匐小菊為材料，建立匍匐小菊的葉盤(pán)再生體系。取得以下研究結(jié)果： 1.利用CVB、TAV、CChMVd的已知基因序列設(shè)計(jì)引物，對(duì)這三種病毒進(jìn)行了RT-PCR檢測(cè)，建立了RT-PCR檢測(cè)技術(shù)體系，并克隆了特異擴(kuò)增產(chǎn)物，測(cè)序結(jié)果與已報(bào)道的基因序列進(jìn)行核苷酸同源性分析。RT-PCR得到的CVB基因的部分片段，長(zhǎng)633bp，該序列與已發(fā)表的序列同源性在82％左右。RT-PCR得到的TAV基因的部分片段，長(zhǎng)842b

3、p，該序列與已發(fā)表的序列同源性在98％左右。CChMVd是一種類病毒，通過(guò)RT-PCR得到的片段，長(zhǎng)217bp，該序列與已發(fā)表的序列同源性在98％以上。 2.以CChMVd為材料測(cè)試RT-PCR的靈敏度，結(jié)果表明，PCR體系中含有fg級(jí)病毒RNA，反轉(zhuǎn)錄后，可以檢測(cè)出來(lái)。 3.建立了菊花B病毒(CVB)和番茄不孕病毒(TAV)兩重RT-PCR檢測(cè)體系，檢測(cè)效果與普通RT-PCR相同。 4.利用得到的TAV CP的